亞慢性毒性試驗(yàn)最常用,重點(diǎn)介紹。
1.試驗(yàn)期限
無(wú)完全統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)。一般認(rèn)為在環(huán)境毒物中,需連續(xù)接觸3~6個(gè)月,但在工業(yè)毒物中1~3個(gè)月即可。(慢性:1年以上或2年)。
2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
一般要求選擇兩個(gè)動(dòng)物種屬,即嚙齒類(如小鼠、大鼠)和非嚙齒類(如狗、猴)。大鼠常用Wistar和Sprague-Dawley品系。個(gè)體選擇一般選擇未成年的健康動(dòng)物,大鼠80/100g(6~8周齡)。每組小動(dòng)物數(shù)不少于20只,大動(dòng)物不少于6~8只。如需要在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中處死部分動(dòng)物,則每組動(dòng)物數(shù)要相應(yīng)增加。性別為雌雄各半。(慢性:初斷乳的動(dòng)物。大鼠40~60只)。
3.染毒途徑
染毒途徑的選擇應(yīng)盡量模擬人類在環(huán)境中接觸該受試物的途徑或方式,并與預(yù)期進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)的接觸途徑相一致。
主要有經(jīng)消化道、經(jīng)呼吸道和經(jīng)皮膚三種。①經(jīng)消化道:大鼠灌胃法,食品用喂飼法,摻入量8g/100g.大動(dòng)物通常使用膠囊法染毒;②經(jīng)呼吸道:染毒受試物濃度穩(wěn)定后,吸入時(shí)間2~6小時(shí)/天;③經(jīng)皮膚:每天染毒4~6小時(shí),防舔食。每天染毒時(shí)間一致,宜上午,先給藥后進(jìn)食。
4.染毒劑量與分組
為了得到明確的劑量-反應(yīng)關(guān)系,一般至少設(shè)三個(gè)劑量組和一個(gè)陰性對(duì)照組。高劑量組應(yīng)能引起較為明顯的毒效應(yīng),但無(wú)動(dòng)物死亡或僅有個(gè)別動(dòng)物死亡(<10%);中劑量組理想時(shí)相當(dāng)于LOAEL;低劑量組應(yīng)相當(dāng)于NOAEL。具體劑量可以l/20~1/5LD50為高劑量組劑量,高、中、低各劑量組間距在3~10倍之間,最低不小于2倍。(慢性:以LD50除以10、100、1000作為三劑量組劑量)。