1、樣本采集時(shí)間若對同一病人作多次測定最好每次在同一時(shí)間收集標(biāo)本,便于比較,以減少人體內(nèi)各分析物晝夜變化的影響。晝夜變化有內(nèi)在因素(主要取決于人是在活動還是在睡眠狀態(tài)),以及外來因素(如飲食、體育活動或其他和某一特定時(shí)間有關(guān)的活動)。
血樣標(biāo)本采集理想的時(shí)間是早晨7:00到8:00,尤其在目的為監(jiān)測時(shí),最后一次食物和液體攝入應(yīng)在前一天下午6:00到7:00;對于某些試驗(yàn)要有特殊的說明。如做糖耐量試驗(yàn)或餐后兩小時(shí)血糖的病人,一定要詳細(xì)告訴病人何時(shí)抽血等事宜。
2、采樣系統(tǒng)的使用長期以來,我國臨床生化采血沒有統(tǒng)一的器材,有的使用經(jīng)反復(fù)洗滌的玻璃試管,有的使用一次性塑料試管,使用中存在不少問題,如試管洗滌不干凈造成溶血或殘存物質(zhì)對測定的干擾;軟質(zhì)塑料試管采血,血液自然凝固析出血清時(shí)間長,容易造成血清中被檢成分的改變,如葡萄糖酵解、酶活性降低、細(xì)胞中鉀離子外溢等。
血樣標(biāo)本最好采用真空采血系統(tǒng),這是保證質(zhì)量的重要措施之一。目前推廣使用真空采血系統(tǒng)可有效避免用錯抗凝劑,保證了血與抗凝劑比例,解決了交叉污染,防止標(biāo)本溶血,加分離膠還可加速血清分離等有效措施。真空采血系統(tǒng)采集血液后,應(yīng)輕輕顛倒混勻5~10次,以確??鼓齽┖痛倌齽ǚ蛛x膠)發(fā)揮作用。
3、正確使用抗凝劑 目前常用的抗凝劑有肝素、EDTA鹽和枸櫞酸鹽,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)正確使用相應(yīng)的抗凝劑,且標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)注意血液與抗凝劑的比例。
(1)肝素:通常用肝素鋰,濃度為14.3IU/mL血,用量范圍為12~30IU/mL,常用于血粘度測定,血?dú)馑釅A分析及酶學(xué)檢查。
?。?)EDTA鹽:通常用EDTA-K2,濃度為1.5~2.0mg/dl,常用于全血細(xì)胞計(jì)數(shù)及血粘度測定。
(3)枸櫞酸鹽:通常用枸櫞酸鈉,濃度為109mmol/L或3.8%,主要用于凝血試驗(yàn)(抗凝劑與血液1:9混合,過高或過低,均可影響PT、APTT的結(jié)果),RBC沉降率試驗(yàn)(抗凝劑與血液1:4混勻)。
4、標(biāo)本的運(yùn)送血液標(biāo)本采集后應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,盡快檢驗(yàn),減少標(biāo)本的放置時(shí)間,因?yàn)榧?xì)胞的代謝、光學(xué)、化學(xué)反應(yīng)、微生物分解及其蛋白質(zhì)酶的裂解都將對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。
目前,多數(shù)醫(yī)院住院病人的血液標(biāo)本都是由夜班護(hù)士完成采血,由于工作的特殊性,任務(wù)重、時(shí)間緊,大多數(shù)護(hù)士采集時(shí)間在早晨5~6點(diǎn),而檢驗(yàn)時(shí)間在上午9~10點(diǎn)開始,這樣無疑就耽擱了四五個(gè)小時(shí)。血標(biāo)本的化學(xué)成分在放置后可有某些變化。
如標(biāo)本放置時(shí)間過久,可由于糖酵解而導(dǎo)致血糖下降;有些物質(zhì)可以通過紅細(xì)胞膜或由于紅細(xì)胞的破壞而進(jìn)入血漿,如紅細(xì)胞內(nèi)鉀、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶等;血漿中無機(jī)磷可由紅細(xì)胞內(nèi)有機(jī)磷酸酯水解而增加,因此測無機(jī)磷時(shí)應(yīng)及分離血清;有些不穩(wěn)定的酶放置后易失活,如酸性磷酸酶等。因此,常規(guī)生化標(biāo)本采集后應(yīng)由專人及時(shí)收取或送檢,急診標(biāo)本隨留隨送。采集后的標(biāo)本放置時(shí)間越短,結(jié)果的變異就越小。
如標(biāo)本確實(shí)不能及時(shí)檢測,必須貯存時(shí)應(yīng):(1)防止蒸發(fā):血標(biāo)本應(yīng)貯存在密閉的容器中,即使貯存在冰箱內(nèi),蒸發(fā)的危險(xiǎn)性依然存在。(2)血標(biāo)本貯存的溫度越低,血樣保存時(shí)間越長。但是特殊指標(biāo)如血液形態(tài)學(xué)指標(biāo)除外。(3)血樣保存應(yīng)豎立放置以加快凝血。(4)避免晃動血樣,以免產(chǎn)生溶血。(5)貯存時(shí)注意避光,盡量隔絕空氣。(6)血樣深冷凍再溶解后,應(yīng)重復(fù)混勻數(shù)次,以防檢測物質(zhì)分布不均。
全血采取后應(yīng)盡快自然地使血清(漿)從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來。一般應(yīng)于采血后2小時(shí)內(nèi)分離出血清或血漿,以防止血細(xì)胞內(nèi)外多種成分發(fā)生變化。血清標(biāo)本離心前一般要先自行凝集,所等的時(shí)間包括凝血和血塊收縮時(shí)間,通常這個(gè)過程大致要30分鐘,加促凝劑時(shí)凝集可加快,切勿用竹簽剝離凝血塊,因人為剝離會誘導(dǎo)溶血。
血漿標(biāo)本的最大優(yōu)點(diǎn)在于及時(shí)檢測,而不需要等到血液凝固后檢測,而且可以避免血液凝固引起的輕度溶血所導(dǎo)致的錯誤,血漿標(biāo)本還可避免血凝過程中RBC釋放鉀離子和酶,使得鉀離子和部分酶增高,另一方面血清標(biāo)本由于缺乏纖維蛋白原,而使血清總蛋白較低。
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