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霍亂弧菌的微生物學(xué)診斷

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  霍亂弧菌(V.cholera)是人類霍亂的病原體,而霍亂是一種古老且流行廣泛的烈性傳染病之一,曾在世界上引起多次大流行,主要表現(xiàn)為劇烈的嘔吐,腹瀉,失水,死亡率甚高,屬于國(guó)際檢疫傳染病。

  霍亂弧菌包括兩個(gè)生物型:古典生物型(Classical biotype)和埃爾托生物型(EL-Tor bio-type)。這兩種類型除個(gè)別生物學(xué)性狀稍有不同外,形態(tài)和免疫學(xué)性基本相同,在臨床病理及流行病學(xué)特征上沒(méi)有本質(zhì)的差別。自1817年以來(lái),全球共發(fā)生了七次世界性大流行,前六次病原是古典型霍亂弧菌,第七次病原是埃爾托型所致。

  1992年10月在印度東南部又發(fā)現(xiàn)了一個(gè)引起霍亂流行的新血清型菌株(0139),它引起的霍亂在臨床表現(xiàn)及傳播方式上與古典型霍亂完全相同,但不能被01群霍亂弧菌診斷血清所凝集,抗01群的抗血清對(duì)0139菌株無(wú)保護(hù)性免疫。在水中的存活時(shí)間較01群霍亂弧菌長(zhǎng),因而有可能成為引起世界性霍亂流行的新菌株。

  其檢驗(yàn)方法有以下幾點(diǎn):

  (一)直接鏡檢

  采取病人“米泔水樣”大便或嘔吐物。鏡檢(涂片染色及懸滴法檢查)觀察細(xì)菌形態(tài),動(dòng)力特征。

  (二)細(xì)菌分離培養(yǎng)

  可將材料接種至堿性蛋白胨水37℃培養(yǎng)6~8小時(shí)后,取生長(zhǎng)物作形態(tài)觀察,并轉(zhuǎn)種于堿性平板作分離培養(yǎng),取可疑菌落作玻片凝集,陽(yáng)性者再作生化反應(yīng)及生物型別鑒定試驗(yàn)。

  (三)特異性制動(dòng)試驗(yàn)

  取檢材或新鮮堿性蛋白胨水培養(yǎng)物一滴,置于載玻片上,再加霍亂弧菌多價(jià)診斷血清,加蓋玻片,用暗視野鏡觀察,3分鐘內(nèi)運(yùn)動(dòng)被抑制的即為陽(yáng)性,此法優(yōu)點(diǎn)是快速而特異操作簡(jiǎn)便,但必須有數(shù)量較多的弧菌才檢出。

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  除一般免疫熒光法外,還可用熒光菌球法檢查。

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