血紅蛋白電泳的原理與參考值
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原理:根據(jù)不同的血紅蛋白帶有不同的電荷,等電點(diǎn)不同,在一定的pH緩沖液中,緩沖液的pH大于Hb的等電點(diǎn)時(shí)其帶負(fù)電荷,電泳時(shí)在電場(chǎng)中向陽(yáng)極泳動(dòng),反之,Hb帶正電荷向陰極泳動(dòng)。經(jīng)一定電壓和時(shí)間的電泳,不同的血紅蛋白所帶電荷不同、相對(duì)分子質(zhì)量不同,其泳動(dòng)方向和速度不同,可分離出各自的區(qū)帶,同時(shí)對(duì)電泳出的各區(qū)帶進(jìn)行電泳掃描,可進(jìn)行各種血紅蛋白的定量分析。
參考值:
pH8.6TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳,正常血紅蛋白電泳區(qū)帶:HbA>95%、HbF<2%、HbA2為1.0%~3.1%。pH8.6TEB緩沖液適合于檢出HbA、HbA2、HbS、HbC,但HbF不易與HbA分開,HbH與HbBarts不能分開和顯示,應(yīng)再選擇其他緩沖液進(jìn)行電泳分離。
pH6.5TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳,主要用于HbH和HbBarts的檢出。HbH等電點(diǎn)為5.6,在pH6.5TEB緩沖液中電泳時(shí)泳向陽(yáng)極,HbBarts則在點(diǎn)樣點(diǎn)不動(dòng),而其余的血紅蛋白都向陰極移動(dòng)。
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