酶活性的測定:定時法
通過測定酶反應(yīng)開始后某一時間段內(nèi)(t1到t2)產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法。其中t1往往取反應(yīng)開始的時間。
酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時間,通過加入強酸、強堿、蛋白醫(yī)學教育網(wǎng)整理沉淀劑等,使反應(yīng)完全停止(也叫中止反應(yīng)法)。加入試劑進入化學反應(yīng)呈色測出底物和產(chǎn)物的變化。
該法最基本的一點是停止反應(yīng)后才測定底物或物的變化。
優(yōu)點:簡單易行,對試劑要求不高。
缺點:難保證測定結(jié)果的真實性。
難以確定反應(yīng)時間段酶促反應(yīng)是否處于線性期。隨著保溫時間的延續(xù),酶變性失活加速。
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