革蘭染色兩步法在陰道分泌物涂片的臨床應(yīng)用體是微生物檢驗(yàn)必不可少的一項(xiàng)知識(shí)，檢驗(yàn)人員都應(yīng)該了解的，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了相關(guān)內(nèi)容，希望能夠幫到大家。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

比較革蘭染色兩步法與傳統(tǒng)四步法對(duì)陰道分泌物涂片標(biāo)本染色的臨床意義。 方法 收集了100例主訴外陰瘙癢和陰道病患者的陰道分泌物的標(biāo)本，對(duì)其涂片分別采用二步革蘭染色兩步法和革蘭染色四步法進(jìn)行染色，并對(duì)結(jié)果比較。結(jié)果 兩種染色方法的比較無(wú)顯著性差異 結(jié)論 新兩步法可以替代四步法，值得推廣應(yīng)用。

陰道炎是婦科門(mén)診常見(jiàn)的病癥之一。醫(yī)學(xué)教/育網(wǎng)搜集整理確診主要是依據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)陰道分泌物的病原學(xué)檢查。陰道分泌物涂片染色法是常用的方法之一。但傳統(tǒng)的革蘭四步染色法，操作繁瑣，時(shí)有誤差。為進(jìn)一步探索新的革蘭染色兩步法與傳統(tǒng)四步法對(duì)臨床標(biāo)本染色的差異及其意義，2007年7月到11月作者收集了100例（20-55歲）主訴白帶增多，有異味，外陰瘙癢婦科門(mén)診患者陰道分泌物的標(biāo)本，對(duì)其涂片分別采用新的革蘭染色二步法和傳統(tǒng)的革蘭染色四步法，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了比較。結(jié)論兩種方法的結(jié)果比較無(wú)顯著性差異。說(shuō)明臨床標(biāo)本采用新型的革蘭染色兩步法的染色結(jié)果完全可以替代經(jīng)典的革蘭染色四步法。

材料與方法：

1.對(duì)象

100例陰道分泌物標(biāo)本均取自醫(yī)院婦科門(mén)診。檢測(cè)試劑：革蘭兩步法染色液。

2.每份標(biāo)本涂片兩張，一張做新的革蘭兩步法染色，另一張做傳統(tǒng)革蘭四步法染色。革蘭氏染色兩步法

步驟：以消毒棉簽蘸取陰道后穹隆及宮頸管處的分泌物制成涂片，涂片時(shí)將拭子在玻片上稍用力滾動(dòng)一周，后用95%泌物的乙醇固定，自然干燥。加入新型的革蘭染色兩步法的A液（蘭色）1-2滴使之蓋滿(mǎn)涂膜，染色15秒后，清水沖洗，再加入B液（紅色）1-2滴使之蓋滿(mǎn)涂膜，染色15秒后，清水沖洗后自然干燥，油鏡鏡檢。革蘭氏染色四步法步驟：以消毒棉簽蘸取陰道后穹隆及宮頸管處的分泌物制成涂片，涂片時(shí)將拭子在玻片上稍用力滾動(dòng)一周。涂片干燥后經(jīng)火焰加熱固定，加入染色液。龍膽紫液染色10秒后水洗，甩干。碘溶液染色10秒后水洗，甩干。脫色液脫色10秒后水洗，甩干。沙黃溶液復(fù)染10秒后水洗，自然干燥，油鏡鏡檢。

結(jié)果： 在念珠菌性陰道炎中，可見(jiàn)明顯的菌絲相，孢子相，菌絲胞子雙相的涂片染色。二步法與四步法均可見(jiàn)霉菌孢子呈西瓜子樣，鏡下可找到成群革蘭陽(yáng)性濃染的卵圓形孢子，可見(jiàn)芽生孢子和假菌絲（細(xì)長(zhǎng)而直，有分枝或者隔，呈節(jié)段狀，形狀似竹竿）兩步法的視野清晰，未見(jiàn)明顯雜質(zhì)。在細(xì)菌陰道炎中，二步法染色可見(jiàn)紫藍(lán)色的棒狀乳酸桿菌大量減少，可發(fā)現(xiàn)有大量深紫色小桿菌或球狀桿菌聚集在淡紅色上皮細(xì)胞上形成其邊緣灰暗呈鋸齒狀的線(xiàn)索細(xì)胞。上皮細(xì)胞，漿豐富，染成淡紅色，邊緣色深，視野清晰，小桿菌及球狀桿菌染成深藍(lán)色。醫(yī)學(xué)教/育網(wǎng)搜集整理總體來(lái)說(shuō)陰道分泌物涂片四步法染色與兩步法相比基本無(wú)差異。