方法名稱： 哈西奈德溶液—哈西奈德的測定—高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定哈西奈德溶液中哈西奈德的含量。

本方法適用哈西奈德溶液。

方法原理： 將供試品加入內(nèi)標溶液，經(jīng)超聲溶解后制成流動相溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長238nm處檢測哈西奈德（C24H32ClFO5）和內(nèi)標黃體酮的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1.甲醇

2.乙醚

儀器設備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按哈西奈德峰計算應不低于 2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 乙醚= 76 24 4

2.2 檢測波長：238nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密量取本品適量，加甲醇制成每1mL中含有0.1mg的溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取哈西奈德對照品適量，加甲醇制成每1mL中含有0.1mg的溶液，精密量取該溶液10mL與內(nèi)標溶液5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標溶液的制備

取黃體酮適量，加流動相制成每1mL中含有0.15mg的溶液，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

精密量取上述供試品溶液10mL與內(nèi)標溶液5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液的續(xù)濾液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長238nm處測定哈西奈德和內(nèi)標黃體酮的吸收值，按內(nèi)標法以峰面積分別計算哈西奈德的含量，即得。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p394。