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生物素-親合素系統(tǒng)-檢驗技士考試輔導(dǎo)

2014-02-28 16:51 來源:
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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編搜集了有關(guān)檢驗技士考試的復(fù)習(xí)知識點,如下:

活性

鏈霉親和素(streptavidin,SA)是由鏈霉菌streptomyces avidinii分泌的一種蛋白質(zhì),分子量為65kD.鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成,其氨基酸組成中,甘氨酸和丙氨酸的含量較大,而且結(jié)合生物素的活性基團(tuán)也是肽鏈中的色氨酸殘基;鏈霉親和素是一種稍偏酸性(pH6.0)的蛋白質(zhì),并且不帶任何糖基。

鏈霉親和素分子中每條肽鏈都能結(jié)合一個生物素,因此與親和素一樣,一個鏈霉親和素分子也能結(jié)合4個生物素分子,二者親和常數(shù)(K)亦為1015L/mol.在蛋白水解酶作用下,鏈霉親和素可在N端10~12和C端19-21間斷裂,形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結(jié)合生物素的能力。鏈霉親和素的活性單位也是以結(jié)合1μg生物素所需的量來表示,1mg鏈霉親和素的最高活性可達(dá)18U。

特點

生物素(biotin,B)廣泛分布于動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244. biotin 31Da.生物素分子有兩個環(huán)狀結(jié)構(gòu),其中Ⅰ環(huán)為咪唑酮環(huán),是與親和素結(jié)合的主要郎部位;II環(huán)為噻吩環(huán),C2上有一戊酸側(cè)鏈,其末端羧基是結(jié)合抗體和其他生物大分子的惟一結(jié)構(gòu),經(jīng)化學(xué)修飾后,生物素可成為帶有多種活性基團(tuán)的衍生物——活化生物素。親和素(avidin,AV)亦稱抗生物素蛋白、卵白素,是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的堿性糖蛋白,分子量為68kD,等電點pI=10.5;耐熱井耐受多種蛋白水解酶的作用。尤其是與生物素結(jié)合后,穩(wěn)定性更好。每個親和素能結(jié)合4個分子的生物素,二者之間的親和力極強(qiáng),親和素常數(shù)(K)為1015L/mol,比抗原與抗體間的親和力(K=10.5~11L/mol)至少高1萬倍,因此二者的結(jié)合特異性高和穩(wěn)定性好。親和素以結(jié)合1μg生物素所需的量作為其活性單位,1mg鏈霉親和素的最高活性可達(dá)18單位。

因此,BAS即可用于微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究,亦可制成親和介質(zhì)用于上述各類反應(yīng)體系中反應(yīng)物的分離、純化。

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