
摘 要:目的建立重組德國小蠊變應(yīng)原Bla g2(rBla g2)誘導(dǎo)的小鼠變態(tài)反應(yīng)氣道炎癥動物模型。
方法 在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達Bla g2重組蛋白,用鎳親和柱層析法提純重組蛋白;24只BALB/c小鼠隨機分為德國小蠊粗浸液組(A組)、德國小蠊粗浸液+重組Bla g2組(B組)、重組Bla g2(C組)、陰性對照組(D組)。分別通過HE染色和PAS染色(periodic acid-Schiff)觀察小鼠肺部炎癥和黏液分泌;觀察支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞總數(shù)和細胞分類;用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測BALF、脾細胞培養(yǎng)上清的細胞因子和血清rBla g2特異的IgE、IgG1、IgG2a抗體。
結(jié)果 成功表達、純化Bla g2重組蛋白;A、B與C組肺部病理改變呈現(xiàn)明顯的變態(tài)反應(yīng)性炎癥;BALF中的細胞總數(shù)、中性粒細胞數(shù)、EOS計數(shù)、IL-4、血清抗原特異性IgE抗體、IgG1抗體和脾細胞分泌IL-4均顯著高于陰性對照組(P<0.01)。
結(jié)論 用rBla g2能成功建立小鼠變態(tài)反應(yīng)氣道炎癥動物模型。