1.外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離原理：外周血中單個(gè)核細(xì)胞（淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞）的比重與紅細(xì)胞、多核白細(xì)胞及血小板不同，介于1.075～1.090之間，紅細(xì)胞及粒細(xì)胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之間。因而可利用一種比重介于1.075～1.092之間，而近于等滲的溶液作密度梯度離心，使一定比重的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布而加以分離。

　　2.試劑：常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。

　?。?）Ficoll分層液法：主要用于分離外周血中單個(gè)核細(xì)胞，是一種單次密度梯度離心分離法，其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層，單個(gè)核細(xì)胞層，粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。Ficoll分層液即聚蔗糖-泛影葡胺，是一種較理想的細(xì)胞分層液，其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物，具有高密度、低滲透壓、無(wú)毒性的特點(diǎn)。操作時(shí)，將分層液置于試管下層，然后將肝素化的全血或白細(xì)胞懸液以Hanks或PBS液稀釋后，輕輕鋪于分層液面上，經(jīng)2000rpm15-20min離心后，紅細(xì)胞與粒細(xì)胞因比重醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理大于分層液，故較快沉于管底。血小板則比重小于分層液而懸浮于血漿中。唯有與分層液比重相當(dāng)?shù)膯魏思?xì)胞和淋巴細(xì)胞密集于血漿層和分層液的界面中。其分布由上到下依次為：稀釋的血漿層，單個(gè)核細(xì)胞層，粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。

　　（2）Percoll分層液法：是一種連續(xù)密度梯度離心分離法，其分布由上至下依次為：死細(xì)胞層，富含單核細(xì)胞組分層，富含淋巴細(xì)胞的組分層及紅細(xì)胞與粒細(xì)胞組分層。