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抗雙鏈DNA抗體(anti-double-strandedDNA,anti-ds DNA)的檢測(cè)

2009-09-25 15:32 來源:
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  抗雙鏈DNA抗體(抗dsDNA)是抗DNA抗體中的一種。其反應(yīng)座位點(diǎn)位于DNA脫氧核糖磷酸框架上??筪sDNA主要出現(xiàn)于SLE患者的血清中,對(duì)SLE患者的組織器官損傷有致病作用。在SLE患者血循環(huán)中,大分子的DNA濃度顯著高于正常人,DNA還可與多種器官的微血管結(jié)構(gòu)包括腎小球基底膜上的硫酸乙酰肝素結(jié)合,抗dsDNA抗體可與這些循環(huán)中的和器官原位的DNA分子反應(yīng),形成抗原抗體復(fù)合物,激活炎癥系統(tǒng)如補(bǔ)體活化途徑,導(dǎo)致組織損傷。也有人認(rèn)為,致病性抗DNA抗體在腎臟中的沉積并非只取決于醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理抗DNA抗體與DNA的結(jié)合,而是通過與基底膜上硫酸乙酰肝素、層粘連蛋白(laminin、心磷脂等非DNA抗原的交叉反應(yīng)或靜電引力作用固定于腎臟,誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)??笵NA自身抗體中有的有致病性,有的沒有致病性。致病性的抗DNA抗體具有以下特性:親和性高,能與補(bǔ)體結(jié)合,能結(jié)合dsDNA,帶正電荷,多反應(yīng)性,為IgG類。近年來的研究發(fā)現(xiàn),抗DNA抗體能穿入活的淋巴細(xì)胞,干擾細(xì)胞功能,引起細(xì)胞凋亡,抗dsDNA抗體也能進(jìn)入腎小球膜細(xì)胞,引起腎小球細(xì)胞增殖,促細(xì)胞融合和蛋白尿形成。這可能是致病性抗DNA抗體的另一特征。

  目前,測(cè)定抗dsDNA的常用方法有4種,綠蠅短膜蟲(CL)間接免疫熒光(IIF)或免疫酶染色(BES)法、放射免疫分析法(Farr試驗(yàn))、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、滴金免疫滲濾試驗(yàn)(DIGFA)。

  參考值

  健康人血清1∶10稀釋為陰性(綠蠅短膜蟲法)。

  健康人結(jié)合率≤20%(放射免疫分析法Farr試驗(yàn))。

  一般以待測(cè)血清A值/陰性對(duì)照A值(P/N)≥2.1為陽性,正常人P/N值<2.1(ELISA法)。

  正常人為陰性(NC膜上不出現(xiàn)著色點(diǎn))(滴金免疫滲濾試驗(yàn))。

  臨床意義

  抗dsDNA自身抗體是SLE的最重要的自身抗體,檢出率40%~70%。高滴度抗dsDNA的存在是SLE診斷的重要依據(jù),也是疾病活動(dòng)性特別是腎臟損傷的標(biāo)醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理志。除用于SLE的診斷外,也可用于臨床病程和治療效果的監(jiān)測(cè),對(duì)判斷預(yù)后也有一定價(jià)值。但也有人報(bào)道在肝臟疾病、青少年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,乃至正常人中發(fā)現(xiàn)低滴度抗dsDNA。

  注意事項(xiàng)

  上述幾種檢測(cè)技術(shù)的特異性都不是100%的。例如,綠蠅短膜蟲動(dòng)基體中雖不含ss-DNA,但可能含少量組蛋白,放免法、ELISA法、滴金滲濾法醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理等用作抗原的dsDNA,也常常含有ssDNA,而即使污染的ssDNA不足1%,引起的假陽性即可高達(dá)6%。因此,對(duì)抗dsDNA的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床分析,必要時(shí)應(yīng)動(dòng)態(tài)觀察。此外,鑒于檢測(cè)試劑中DNA抗原的來源不同,堿基組成和順序可能有一定差異,使抗體結(jié)合的表位發(fā)生變化。

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