1.1在動(dòng)物的選擇

　　一般多選用大鼠、家兔、豚鼠等動(dòng)物來制備含藥血清，但不同種屬的動(dòng)物，其血清成分不同，因此在選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)盡量選用與人類生物學(xué)活性近似的物種。劉成海等提出在體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中宜采用同一種單一血清，既為細(xì)胞提供營養(yǎng)，又為藥物提供載體，還避免了多種血清的干擾醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理，一般家兔和大鼠應(yīng)為首選。

　　1.2灌胃次數(shù)與時(shí)間間隔

　　有7～10d法（1次/d，連用7～10d），3次給藥法（連續(xù)給藥3次，笫1、2次間隔20h，第2、3次間隔4h），2次給藥法（第1次給藥后2h，再以相同劑量重復(fù)1次）等。各種給藥方式都是為了達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度，從而便于藥物作用機(jī)理的研究。不過嚴(yán)格地說應(yīng)該按藥物半衰期給藥，連續(xù)5～7個(gè)半衰期達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度，但由于中藥及其復(fù)方成分復(fù)雜，半衰期很難測(cè)定，所以7～10d給藥為權(quán)宜之計(jì)。如果對(duì)藥物血清時(shí)效關(guān)系進(jìn)行研究，則應(yīng)另當(dāng)別論。

　　1.3給藥劑量

　　在實(shí)驗(yàn)中，由于含藥血清加入體外反應(yīng)系統(tǒng)后，濃度將被稀釋，從而達(dá)不到在體條件下的藥物濃度，反應(yīng)系統(tǒng)可能出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，針對(duì)此種情況，李氏等提出按新藥藥理研究的技術(shù)要求設(shè)計(jì)劑量給藥，將含藥血清制成冷凍干燥粉（凍干粉），以凍干粉形式加入反應(yīng)系統(tǒng)，使之達(dá)到所需要的濃度。劉平認(rèn)為給藥劑量應(yīng)以整體模型動(dòng)物的有效劑量（即為臨床成人劑量的8～18倍量）為妥。

　　1.4含藥血清的采集

　　大鼠一般給藥1～2h后血藥濃度達(dá)峰值，此時(shí)血清為最佳含藥血清，超過一天的時(shí)間，大部分藥物成分已經(jīng)被代謝和排泄，藥物的直接作用消失，此時(shí)的血清為機(jī)體功能狀態(tài)血清。醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理當(dāng)然還要考慮例外，因此最好是通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定最佳采血時(shí)間。

　　1.5含藥血清滅活與否

　　許多學(xué)者觀點(diǎn)不一。有的將含藥血清經(jīng)56℃30min滅活，但也有的不經(jīng)滅活，直接進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。劉成海等發(fā)現(xiàn)正常大鼠血清無論滅活與否均可維持大鼠肝貯脂細(xì)胞的貼壁生長，兩組大鼠血清對(duì)肝貯脂細(xì)胞內(nèi)3H-TdR摻入的影響無明顯差異，劉氏主張血清經(jīng)56℃30min滅活，可排除非藥理性干擾。但徐海波等認(rèn)為藥物血清不宜滅活，因血清經(jīng)滅活以后，血清中含有的機(jī)體在藥物作用下產(chǎn)生的內(nèi)源性有效成分將減少或喪失，生物活性降低，會(huì)影響藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床用藥情況也不相符。對(duì)于血清非藥理性干擾可采取空白對(duì)照來衡定和排除，而細(xì)胞培養(yǎng)中的微生物感染，也可用微孔濾膜除菌法來防止。