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溶血性鏈球菌的檢驗是微生物檢驗主管技師考試可能涉及的考點,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)做了整理,供大家參考。
1、樣品處理:取25g固體(或25mL液體)檢樣加入225mL滅菌生理鹽水,制成混懸液。
2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯,或直接劃線于血平板(如檢樣污染嚴(yán)重,可同時接種5mL至匹克氏肉湯),36℃培養(yǎng)24h,接種血平板,36℃培養(yǎng)24h,挑起乙型溶血圓形突起的細(xì)小菌落,在血平板上分純,觀察在液體和固體中的培養(yǎng)特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態(tài),并進行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。
3、鏈激酶試驗:吸取草酸鉀血漿0.2mL,加0.8mL滅菌生理鹽水,混勻,再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL,混勻,置于36℃水浴10min,血漿混合物自行凝固,觀察凝塊重新完全溶解的時間,完全溶解為陽性,如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照,用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。
4、桿菌肽敏感試驗:取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上,36℃培養(yǎng)18-24h,如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。
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