舊書不厭百回讀，熟讀精思子自知。“藥物分析知識(shí)點(diǎn)--紫外分光光度法”醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編專門整理如下，希望對(duì)各位考生備考復(fù)習(xí)有所幫助。

1.儀器的校正和檢定

由于溫度變化對(duì)機(jī)械部分的影響，儀器的波長(zhǎng)經(jīng)常會(huì)略有變動(dòng)，因此除應(yīng)定期對(duì)所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外，還應(yīng)于測(cè)定前校正測(cè)定波長(zhǎng)。常用汞燈中的較強(qiáng)譜線237.83、 253.65、 275.28、296.73、313.16、334.15、365.02、404.66、435.83、546.07與576.96nm，或用儀器中氘燈的486.02與656.10nm譜線進(jìn)行校正，鈥玻璃在279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、 536.2與637.5nm波長(zhǎng)處有尖銳吸收峰，也可作波長(zhǎng)校正用，但因來(lái)源不同會(huì)有微小的差別，使用時(shí)應(yīng)注意。

吸收度的準(zhǔn)確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，按下表規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算其吸收系數(shù)。 規(guī)定的吸收系數(shù)如下表，相對(duì)偏差可在±1％以內(nèi)。

波長(zhǎng) （nm） 235（最?。?257（最大） 313（最?。?350（最大）

吸收系數(shù)E1% 1cm 124.5 144.0 48.62 106.6

雜散光的檢查可按下表的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在下表規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。

試劑 濃度% （g/ml） 測(cè)定用波長(zhǎng)（nm） 透光率 （%）

碘化鈉 1.00 220 ＝（A／A）C

式中

C為供試品溶液的濃度；

A為供試品溶液的吸收度；

C為對(duì)照品溶液的濃度；

A為對(duì)照品溶液的吸收度醫(yī),學(xué)教育網(wǎng)。

（2） 吸收系數(shù)法

按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。用本法測(cè)定時(shí)，應(yīng)注意儀器的校正和檢定。

（3） 計(jì)算分光光度法

采用計(jì)算分光光度法應(yīng)慎重。本法有多種，使用時(shí)均應(yīng)按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行。當(dāng)吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測(cè)定時(shí)，影響精度的因素較多，故對(duì)照品和供試品測(cè)試條件應(yīng)盡可能一致。若測(cè)定時(shí)不用對(duì)照品，如維生素A測(cè)定法，則應(yīng)在測(cè)定時(shí)對(duì)儀器作仔細(xì)的校正和檢定。

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