舊書不厭百回讀，熟讀精思子自知。“甲氨蝶呤-藥物分析”醫(yī)學教育網(wǎng)小編專門整理如下，希望對各位考生備考復(fù)習有所幫助。

一、方法名稱：

甲氨蝶呤原料藥——甲氨蝶呤——高效液相色譜法應(yīng)用范圍：本方法采用高效液相色譜法測定甲氨蝶呤原料藥中甲氨蝶呤的含量。本方法適用于甲氨蝶呤原料藥。

二、方法原理：

供試品經(jīng)流動相溶解并定量稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長302nm處檢測甲氨蝶呤的峰面積，計算出其含量。

三、試劑：

1.乙腈

2.7.0%枸櫞酸溶液

3.2.0%無水磷酸氫二鈉溶液

四、儀器設(shè)備：

1.儀器

（1）高效液相色譜儀

（2）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按甲氨蝶呤峰計算應(yīng)不低于1000.

（3）紫外吸收檢測器

2.色譜條件

（1）流動相：乙腈7.0%枸櫞酸溶液2.0%無水磷酸氫二鈉溶液=101080

（2）檢測波長：302nm

（3）柱溫：室溫

五、試樣制備：

1.對照品溶液的制備

精密稱取甲氨蝶呤對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.1mg的溶液，即為對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL中約含甲氨蝶呤0.1mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

六、操作步驟：

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長302nm處測定甲氨蝶呤（C20H22N8O5）的峰面積，計算出其含量。

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