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crispr-cas9在動物模型構(gòu)建、t細(xì)胞治療以及基因表達(dá)調(diào)控中的應(yīng)用

2018-03-02 09:28

高效精確的基因工程技術(shù)對于發(fā)展基因治療,建立細(xì)胞和動物疾病模型具有極為重要的價值。近年來特異性定點核酸酶的研究取得了長足的進(jìn)步。為了突破傳統(tǒng)基因打靶方法的局限,我們率先通過受精卵注射CRISPR-Cas9一步獲得多基因敲除的小鼠。為了取代低通量且技術(shù)要求極高的顯微注射技術(shù),我們建立了受精卵電擊的方法,從而極大簡化了動物模型的構(gòu)建。這一系列工作大大提高了基因修飾小鼠構(gòu)建效的率和速度,為疾病和發(fā)育生物學(xué)的體內(nèi)研究提供了重要的工具。同時我們在原代T細(xì)胞和表達(dá)嵌合性抗原受體的T細(xì)胞(CART)中建立了高效的單基因和多基因敲除技術(shù),為細(xì)胞免疫治療研究提供了工具。除了基因編輯,我們也基于CRISPR-Cas9系統(tǒng)建立了新技術(shù),用來調(diào)控基因的表達(dá)水平和表觀遺傳修飾狀態(tài)。

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