微生物培養(yǎng)基的成分|制法|用途不僅僅是醫(yī)學檢驗士要考的內容，也是我們工作中需要用到的知識，想知道微生物培養(yǎng)基的成分|制法|用途請閱讀一下內容，要系統(tǒng)了解知識點就請報名參加我們的課程吧。

一、營養(yǎng)瓊脂（普通瓊脂)

成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏湯)100毫升

瓊脂（視天氣，瓊脂質量而定)

制法：將上物加熱溶解，補足水，調ph至7.6，過濾分裝121℃，高壓滅菌15分鐘。

用途：作普通瓊脂平皿。

二、血瓊脂平板（BA)

制法：取營養(yǎng)瓊脂（PH7.6)，加熱使其溶解待冷至45-50℃，以滅菌操作于每100毫升營養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻，立即傾注于平板或分裝試管，制成斜面?zhèn)溆谩?

用途：

1．一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。

2.尿液，膿液

3．分離細菌標本用。

三、基礎培養(yǎng)基（肉膏湯BB)

成份：蛋白胨10克牛肉膏5克

氯化鈉5克水1000毫升

制法：將以上各物稱好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7.6，過濾分瓶，121℃高壓滅菌，20分鐘備用。

用途：

1作耐藥試驗，增菌用分裝小管。

2作普通瓊脂斜面。

四、血液培養(yǎng)基（大管肉湯培養(yǎng)基)

成份：

1新鮮牛肉浸液1000毫升

2PABA（對氨基苯甲酸〔相當于10mg/毫升〕)1g%1毫升

3MgSO4[相當于0.493/100毫升]49．3%1毫升

4枸椽酸鈉0.3g

制法：

1將1號，4號混合液，2號，3號液分裝高壓滅菌。

2取滅菌1，4號混合液用無菌法加入PABA，MgSO₄，再分管，行無菌試驗三天方可使用。

用途：作血，骨髓培養(yǎng)用。

五、腸道桿菌培養(yǎng)基（伊紅美蘭瓊脂)

成份：蛋白胨10克乳糖10克

氯化鈉5克瓊脂25（22)克

水1000毫升2%伊紅溶液20毫升

0.5%美蘭溶液20毫升

制法：將蛋白胨，氯化鈉瓊脂稱好，加水1000毫升使溶解，校正PH7.4過濾，補足失水，加入2%伊紅溶液20毫升，0.5%美蘭溶液20毫升，（115℃高壓20分鐘)，冷卻至50℃左右傾注平板，凝固后存冰箱備用。（高壓以后方可再加乳糖)

用途：用作分離沙門氏，志賀氏菌屬，也作菌群調查。

六、羅文斯坦培養(yǎng)基

成份：磷酸二氫鉀2.4克硫酸鎂0.24克

枸椽酸鈉0.6克天門冬素3．6克

純甘油（丙三醇)12毫升水600毫升

馬鈴薯粉30克雞蛋1000毫升（約3公斤)

2%孔雀綠水溶液20毫升

制法：

1除雞蛋外（還有孔雀綠)。可將其它物品稱好，放入大三角瓶包扎好，高壓滅菌。

2雞蛋用75%酒精泡30分鐘，滅菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶內充分將雞蛋搖散。

3將各成份按比例配好，分裝每管約5毫升。

4間歇滅菌第一次90℃1小時，第二次80℃半小時，第三次80℃半小時（或放85℃烤箱內連續(xù)二次)。

質控標準：

1滅菌試驗合格。

2接種結核桿菌要求兩星期生長良好。

用途：作結核分枝桿菌培養(yǎng)用。

七、結核半固體培養(yǎng)基

成份：磷酸氫二鈉19克硫酸鎂0.6克

磷酸二氫鉀2.5克天門冬素5克

1%孔雀綠1．5克甘油20毫升

吐溫80（10%)5毫升水1000毫升

枸椽酸鈉2.5克動物血清100毫升

瓊脂1．5克（80小時用甲醇去脂)

1%孔雀綠0.78毫升吐溫80（10%)5毫升

加動物血清100毫升

制法：

1除血清外將上述藥品均稱好，放入煮沸溶解，調PH7。2

2分管（每管約10毫升)包扎好，高壓，121℃半小時滅菌。

3待冷后無菌法加無菌血清（綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。

4去除瓊脂方法：醫(yī)'學教育網(wǎng)搜集整理取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封，放37℃溫浴80小時，每天搖動一次，冷卻后到時取出用濾紙過濾，待瓊脂自然冷卻后備用。

質控標準：

1無菌實驗合格。

2瓊脂硬度合適而清亮。

3接種標準結核桿菌用，強度合適即可用。

用途：培養(yǎng)結核桿菌用。

八、亞碲酸鉀血瓊脂平板

成份：瓊脂基礎100毫升10%葡萄糖2毫升

1%亞碲酸鉀4.5毫升綿羊血10毫升

制法：

1將瓊脂基礎溶解好，加入羊血。

2馬上加熱使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4.5毫升混合后倒入無菌平板，凝固后存冰箱備用。

質控標準：接種白喉桿菌生長良好，其它革蘭氏陰性菌均抑制生長。

用途：供培養(yǎng)及鑒別白喉桿菌用。

九、米培養(yǎng)基

成份：白米20克水1000毫升

瓊脂20克吐溫8010毫升

制法：

1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘，煮時將容器蓋好。

2用紗布過濾，只要米湯，不要飯，加水至1000毫升。

3加瓊脂20克，吐溫-8010毫升煮溶，分裝中型管（每管約3毫升)，包扎好，高壓，121℃半小時，消毒備用。

質控標準：1滅菌。

2要求清亮。

3接種白色念珠菌17-24小時生長良好，并產(chǎn)生厚膜孢子。

用途：培養(yǎng)白色念珠菌用。

十、蛋白胨水培養(yǎng)基

成份：蛋白胨1克氯化鈉0.5克

水加至100毫升PH調至7.8

制法：把以上各物稱好溶于水，調節(jié)PH7.6分裝消毒備用。

質控標準：1放置37℃無菌生長。

2接種大腸桿菌24小時生長良好。

3可作中國蘭平板基礎液。

可作靛基質基礎液（作此試驗需要色氨酸蛋白胨)。

十一、血培養(yǎng)基

成份：蛋白胨10克牛肉膏5克

氯化鈉5克葡萄糖3克

枸椽酸鈉3克MgSO₄.7H₂O₂5.0毫升

0.5%PABA10毫升酵母浸液10毫升0.2克（2%過濾)

酚紅0.4%6毫升水1000毫升

瓊脂0.5克 作大BB，小BB時，不要加酚紅和瓊脂。

制法：

1、除PABA、硫酸鎂、酚紅外均稱好煮化調PH7.4

2、調好PH后再加酚紅。

3、硫酸鎂、PABA另外無菌再加入（亞細，小BB)

十二、沙氏培養(yǎng)基

成份：蛋白胨1克水100毫升

瓊脂1．5克（瓊脂粉1克%)葡萄糖或麥芽糖4克

制法：

1將上述物質稱好，放入水中煮沸溶解（不必調PH即有5左右)分中號試管（約4毫升)包扎，高壓115℃20分鐘。

2趁熱斜好，凝固備用。

質控標準：

1無菌試驗合格。

2接種霉菌比在其它培養(yǎng)基上生長良好，其它菌生長不好。

用途：作分離培養(yǎng)霉菌用。

注意：

1接種臨床新鮮標本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12.5%氯霉素沙氏斜面培養(yǎng)基上。

2也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麥芽糖。

十三、肉渣培養(yǎng)基

成份：牛肉渣牛肉浸液（牛肉膏)

制法：將做牛肉浸液的牛肉渣，裝入試管，高約3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏湯（PH7.6)約5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高約0.5厘米（不加也可)，121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內備用。

用途：用于厭氧菌培養(yǎng)。

注意：如無肉渣也可用牛、羊血等代替，將血塊先放入水內煮沸，取出成小塊，血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。

十四、單糖發(fā)酵管培養(yǎng)基（半固體)

成份：PH7.6-7.8蛋白胨水1000毫升（0.3克/100毫升)

1.2%酚紅液0.4毫升

瓊脂0.4-0.5克

10%糖或醇10毫升

制備：把蛋白胨水，瓊脂加熱溶解，然后加1．2%酚紅液0.4毫升，10%糖10毫升，混勻，分裝試管，每管約2-3毫升，經(jīng)115℃高壓滅菌20分鐘后，分置于試管架上，貼上各類糖或醇類標簽備用。

質控標準：細菌發(fā)酵糖類或醇而產(chǎn)生酸，能使培養(yǎng)基PH改變，指示劑由紅變黃色，如因發(fā)酵產(chǎn)生氣體則半固體內產(chǎn)生氣泡，如有動力則半固體由清亮變混濁。

十五、明膠培養(yǎng)基

成份：肉浸液1000毫升（牛肉浸膏5克)

明膠12克

制法：

100毫升肉浸液中，加入明膠12克，隔水加熱煮化，校正PH7.2，分裝小號試管，用阿諾氏間歇滅菌80℃30分鐘，連續(xù)3日，或者108℃高壓20分鐘，冷卻，貯存?zhèn)溆谩?

15-1、堿性蛋白胨水

成份：

蛋白胨20克氯化鈉5克

硝酸鉀0.1克結晶碳酸鈉（NaclCO3．12H2O)0.2克

水1000毫升

制法：將蛋白胨，Nacl，硝酸鉀，結晶碳酸鈉稱好，溶于1000DW中，校正PH8．4分裝試管，121℃高壓滅菌15分鐘后備用。

用途：用于霍亂弧菌培養(yǎng)。

十六、葡萄糖蛋白胨水（M。V用)

成份：蛋白胨5克葡萄糖5克

K2HPO45克水1000毫升

制法：將上述稱好溶解分裝試管，調PH7.4高壓滅菌115℃滅菌20分鐘，或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管

標準：滅菌試驗合格。接種大腸桿菌VP陰性，M陽性；接種產(chǎn)氣桿菌VP陽性，M陰性。

用途：作鑒別腸道桿菌用。

十七、枸椽酸鹽培養(yǎng)基

成份：磷酸二氫銨0.1克硫酸鎂0.02克

磷酸氫二鉀0.1克枸椽酸鈉0.23--0.5克（0.36)

氯化鈉0.5克瓊脂1．5克

0.5%溴麝香草酚蘭2毫升（調PH6．8再加)

制法：將上述稱好，放入水中煮沸溶解，調PH6．8，然后分裝中號試管，高壓滅菌，趁熱倒呈斜面，凝固

后備用。

標準：

1、滅菌試驗合格，培養(yǎng)基呈果綠色適宜。

2、接種大腸桿菌，培養(yǎng)基上不生長，也不變色。

3、接種產(chǎn)氣桿菌，培養(yǎng)基呈深蘭色。

用途：作鑒別大腸桿菌用。

十八、雙糖鐵培養(yǎng)基

成份：

下層：蛋白胨1克氯化鈉0.5克

葡萄糖0.2克瓊脂0.3-0.5克

水100毫升

將上述物質混勻調PH7.6后加1．2%酚紅0.4毫升

上層：蛋白胨1克氯化鈉0.5克

乳糖1克硫代硫酸鈉0.03克

硫酸亞鐵0.02克瓊脂1克

水100毫升

制法：1將下層配好，分裝中號試管（1毫升)，塞好包扎，15磅高壓滅菌半小時，使凝固后備用。

2制上層時，先將蛋白胨水制好，加入硫酸亞鐵，硫代硫酸鈉，加熱溶解PH8．1，再加入酚紅分瓶，（每瓶300毫升，稱取瓊脂包扎滅菌，趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112℃消毒15分鐘)。

3取已制的下層管，每管用無菌法倒入上層液約1。5毫升，邊斜放置使成斜面，凝固后備用。

標準：無菌試驗合格，接種大腸桿菌下層產(chǎn)酸產(chǎn)氣，上層產(chǎn)酸。

十九、尿素培養(yǎng)基

成份：蛋白胨0.1克氯化鈉0.5克

磷酸二氫鉀0.2克尿素0.2克（或10%2毫升)

葡萄糖0.01克（或10%葡萄糖0.1毫升)

H2O100毫升酚紅（0.2%)0.4毫升

制法：1除葡萄糖，尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸，使溶解，調PH7.2過濾，15磅高壓滅菌15分鐘．

2配制尿素（滅菌)液：每100毫升基液內加2毫升．

3配制10%葡萄糖（滅菌)每100毫升加0.1毫升．

4分裝小試管待用．

標準：

1滅菌試驗合格．

2接種變形桿菌24小時呈紅色．

用途：鑒定變形桿菌用．

二十、膽鹽中性紅瓊脂

成份：蛋白胨瓊脂PH7.2-7.45000毫升

膽鹽2.5克

乳糖5．0克

對氨基苯甲酸25毫克

1%中性紅溶液25毫升

制法：

將膽鹽，對氨基苯甲酸，乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中，待冷至50-60℃時，加入1%中性紅液2.5毫升，混合后即傾注平皿，凝固待用．

1%中性紅：1克中性紅加酒精60毫升，加水40毫升

二十一、丙二酸鹽培養(yǎng)基（縮蘋果酸鈉)

成份：丙二酸鈉0.3克酵母浸膏0.1克

Nacl0.2克硫酸銨0.2克

K2HPO40.06克KH2PO40.04克

水100毫升

PH6.8，高壓滅菌備用．

0.2%溴麝香酚蘭乙醇1．25毫升

制法：與枸椽酸鹽利用試驗相類似，是測定細菌能否利用丙二酸鹽與碳源．無機銨鹽為氨源而生長，生長者使培養(yǎng)基變成堿呈蘭色．

鑒定：克氏桿菌（+)赫夫尼亞（+)

沙門氏菌（—)痢疾桿菌（—)