培養(yǎng)基的組成成分及其營養(yǎng)物質是醫(yī)學檢驗技士考試所涉及的內容,醫(yī)學教育網提供醫(yī)學檢驗技士考試輔導資料,供廣大醫(yī)學檢驗技士考試考生參考學習。
盡管不同的細菌對營養(yǎng)的要求不同,但細菌需要的營養(yǎng)物質應含有水、氮源、碳源、無機鹽類和生長因子等,常用的營養(yǎng)物質如下:
1.蛋白胨:蛋白胨是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一,提供細菌生長繁殖所需要的氮源。是動物或植物蛋白質經酶或酸堿分解而成。植物胨和動物胨各有優(yōu)點,配制培養(yǎng)基常將兩者按一定比例混合使用,提高培養(yǎng)基的營養(yǎng)價值。蛋白胨易溶于水,遇酸不沉淀,不因受高溫而凝固,并為兩性電解質有緩沖作用。但吸水性強,應注意干燥密封保存。
2.肉浸液:是用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黃嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、無機鹽類等)。還有一些生長因子。肉浸液可為細菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物質過少而不能滿足細菌的需要,因此在制備培養(yǎng)基時應再加入l%~2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。
3.牛肉膏:由肉浸液經長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞,所以其營養(yǎng)價值低于肉浸液,但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基的基礎成分。由于使用方便,常用于制備培養(yǎng)基。
4.糖類、醇類:為細菌生長提供碳源和能源。制備培養(yǎng)基所用的糖類、醇類有多種,常用的糖類有單糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、雙糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇類有甘露醇、衛(wèi)茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外,其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發(fā)酵反應。
5.血液:血液中既含有蛋白質、多種氨基酸、糖類、無機鹽類等營養(yǎng)物質,又能提供輔酶(如V因子)、血紅素(X因子)等特殊生長因子,所以培養(yǎng)基中加入血液用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。另外,還可根據細菌在血液培養(yǎng)基中的溶血現象而進行鑒定。
6.無機鹽類:提供細菌生長的各種元素,如:鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。用于制備培養(yǎng)基的無機鹽類有多種,其中最常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者對維持酶的活性、調節(jié)菌體內外的滲透壓非常重要,后者是細菌良好的磷源,并在培養(yǎng)基中具有緩沖作用。
7.雞蛋和動物血清:雖然不是構成培養(yǎng)基的基本成分,但卻是某些細菌生長所必需的營養(yǎng)物質,所以僅用于制備一些特殊的培養(yǎng)基,這些細菌直接從雞蛋和動物血清中獲取營養(yǎng)。如培養(yǎng)結核分枝桿菌的雞蛋培養(yǎng)基和培養(yǎng)白喉桿菌的呂氏血清培養(yǎng)基等。
8.生長因子:是細菌生長所必需的,但需要量很小。在制備培養(yǎng)基時,常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培養(yǎng)基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。