
紫外可見分光光度法是一種常用的藥物分析法,相信很多朋友對此很感興趣,為了幫助大家了解,小編為大家整理出如下相關(guān)內(nèi)容:
一、基本原理
紫外——可見分光光度法:是根據(jù)物質(zhì)分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。
波長長(頻率小)的光線能量小,波長短(頻率大)的光線能量大。
100nm 200nm 400nm 800nm 400um 1m
通指
X-射線 紫外區(qū) 可見區(qū) 紅外區(qū) 微波區(qū) 無線電波區(qū)
Beer-lambert定律: A=E l c A——吸收度 E-吸收系數(shù) l ——液層厚度 c——溶液濃度
吸收度濃度與厚度的關(guān)系。是吸收光度法的基本定律,重要前提是單色光。
摩爾吸收系數(shù):指在一定波長下,溶液濃度為1mol/L , 厚度為1cm時的吸收度。
百分吸收系數(shù):指在一定波長下,溶液濃度為1%(W/V) , 厚度為1cm時的吸收度。
影響B(tài)eer定律因素:化學(xué)因素,光學(xué)因素
二、紫外——可見分光光度計:
主要部件:
1、光源:要求光譜的光源,氫燈和鎢燈(350nm)
2、單色器:進(jìn)口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件(棱鏡和光柵)、聚焦透鏡和出口狹縫組成。
3、吸收池:用光學(xué)玻璃制成的吸收池,只能用于可見光區(qū)。用熔融石英(氧化硅),可見紫外光區(qū)。
4、檢測器:光電池:(硒光電池:用于可見光;硅光電池:紫外可見光) 內(nèi)阻小,易疲勞。光電管:內(nèi)阻高,電流易放大 .
5、訊號處理和顯示器
三、定性與定量方法
(一)、定性鑒別:是多數(shù)有機(jī)化合物具有吸收光譜特征。一般用對比法。
1、對比吸收光譜特征數(shù)據(jù)
2、對比吸收度(或吸收系數(shù))比值
3、對比吸收光譜的一致性
(二)、純度檢查:雜質(zhì)檢查與雜質(zhì)限量檢測
(三)、含量測定:
1、吸收系數(shù)法
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
3、對照法
以上是小編為大家整理的紫外可見分光光度法的相關(guān)介紹,希望以上內(nèi)容對大家有幫助!更多相關(guān)知識請關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)!
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