系統(tǒng)性紅斑狼瘡的實(shí)驗(yàn)室檢查需檢查什么?
關(guān)于“ 系統(tǒng)性紅斑狼瘡的實(shí)驗(yàn)室檢查需檢查什么?”的問(wèn)題,相信很多 的考生都在關(guān)注,為方便大家了解,在此醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理如下內(nèi)容:
與診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡有關(guān)的免疫學(xué)檢查
LE細(xì)胞
Hargraves(1948)首先在骨髓中發(fā)現(xiàn),Haserick(1949)從外周血中找到LE細(xì)胞。miecher(1954)證明紅斑狼瘡細(xì)胞因子為一種抗核因子,是一種γ球蛋白,現(xiàn)已明確形成LE細(xì)胞需要4個(gè)因素:①LE細(xì)胞因子,是一種抗核蛋白抗體,存在于外周血、骨髓、心包、胸腔和腹腔積液、皰液和腦脊液中,其相應(yīng)抗原為脫氧核糖核酸一組蛋白復(fù)合物,此抗原存在于細(xì)胞核內(nèi);②受損傷或死亡的細(xì)胞核,無(wú)種屬和+器官特異性,即人或動(dòng)物的各種器官的細(xì)胞核均可與LE細(xì)胞因子起作用;③活躍的吞噬細(xì)胞,一般為中性粒細(xì)胞;④補(bǔ)體:在吞噬時(shí)需要補(bǔ)體的參與。LE細(xì)胞形成的過(guò)程首先為L(zhǎng)E細(xì)胞因子與受損傷或死亡的細(xì)胞核起作用,使細(xì)胞核脹大,失去其染色質(zhì)結(jié)構(gòu),核膜溶解,變成均勻無(wú)結(jié)構(gòu)物質(zhì),所謂“勻圓體”細(xì)胞膜破裂,勻圓體墮入血液,許多吞噬細(xì)胞聚合來(lái)吞噬此變性的核,形態(tài)花瓣形細(xì)胞簇,隨后此變性核被一個(gè)吞噬細(xì)胞所吞噬,就形成所謂LE細(xì)胞,補(bǔ)體參與起促進(jìn)吞噬作用
約90%——70%活動(dòng)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者,LE細(xì)胞檢查陽(yáng)性。其他疾病如硬皮病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等中約10%病例可查見(jiàn)該細(xì)胞,此外,慢性活動(dòng)性肝炎、藥疹如普魯卡因酰胺及肼酞嗪(肼苯噠嗪)等引起也可陽(yáng)性。
雖然活動(dòng)性系統(tǒng)性紅斑狼瘡血中可出現(xiàn)LE細(xì)胞,但由于在檢測(cè)時(shí)受多種因素的影響,實(shí)際檢出率并不高。但在無(wú)條件檢測(cè)自身抗體時(shí)仍可繼續(xù)此細(xì)胞的檢測(cè)。
抗核抗體試驗(yàn)(ANA)
ANA是針對(duì)自身各種細(xì)胞核成分產(chǎn)生相應(yīng)抗體的總稱。本試驗(yàn)敏感性高,特異性較差,現(xiàn)象作為篩選性試驗(yàn),一般采用間接免疫熒光法檢測(cè)血清ANA,以鼠肝印片作底物,亦有采用Will-2細(xì)胞,Hep-2細(xì)胞等作底物,約80%——95%病便ANA試驗(yàn)陽(yáng)性,尤以活動(dòng)期為高,反復(fù)測(cè)定累積陽(yáng)性率更高。血清ANA效價(jià)≥1:80,意義較大,效價(jià)變化基本上與臨床病情活動(dòng)度相一致。熒光核型可見(jiàn)周邊型、均質(zhì)型和斑點(diǎn)型,偶見(jiàn)核仁型。另有5%——10%病例,臨床癥狀符合系統(tǒng)性紅斑狼瘡,但ANA持續(xù)陰性,有其它免疫學(xué)特征,可能是一個(gè)亞型。根據(jù)已在臨床上運(yùn)用的免疫熒光(IF)、對(duì)流免疫電泳(CIE)和免疫印跡(IBT)等方法,在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中可檢出十余種ANA。常規(guī)用于臨床診斷的有:
IFANA:在熒光下ANA可被分為4型:均質(zhì)型、斑點(diǎn)型、膜型及核仁型。前3型常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中出現(xiàn),其滴度≥1∶64時(shí)有診斷意義。IFANA在系統(tǒng)性紅斑狼瘡所有的免疫學(xué)檢查中敏感性最高,陽(yáng)性率可達(dá)90%以上,但特異性較差,其他CTD和疾病甚至正常人中均可出現(xiàn)陽(yáng)性,但系統(tǒng)性紅斑狼瘡的滴度特別高,可作為診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的重要指標(biāo)。
抗DNA抗體:該抗體分為天然(雙鏈)DNA(ds-DNA)和變性(單鏈)DNA(ss-DNA)。以綠蠅短膜蟲(Crithidia luciliae)或馬疫錐蟲(Trypanosoma equiperdum)或伊氏椎蟲(Trypanossma evansi)作底物,采用間接免疫熒光法檢測(cè)抗ds-DNA抗體,在系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動(dòng)期其陽(yáng)性率可高達(dá)93%——100%。然而放射免疫法檢測(cè)其陽(yáng)性率為60%——70%,抗ds-DNA抗體熒光核型顯示周邊型最具特異性,提示患者常有腎損害、預(yù)后差。在緩解期,其陽(yáng)性率下降以至陰轉(zhuǎn),終末期患者亦可陰性??箂s-DNA抗體特異性差,除系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)庠谄渌麖浡越Y(jié)締組織疾病中亦可見(jiàn)到。有學(xué)者對(duì)51例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和660例其他自身免疫病的抗ds-DNA抗體進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果50/51的系統(tǒng)性紅斑狼瘡有抗ds-DNA抗體,而其他自身免疫病中1/660陽(yáng)性,顯示抗ds-DNA抗體有很高的特異性,是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的“標(biāo)記抗體”,較高滴度的ds-DNA抗體可視為診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的依據(jù)。而ss-DNA抗體缺乏特異性,對(duì)診斷無(wú)意義。有資料顯示抗ds-DNA抗體與腎臟、心臟受累和腎小球瘢痕形成密切相關(guān),而與中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和肌肉骨骼的受累無(wú)關(guān),但也有資料和實(shí)驗(yàn)顯示并非如此,有抗ds-DNA抗體者腎臟等臟器損害并非很嚴(yán)重。檢測(cè)ds-DNA抗體的方法有多種,但穩(wěn)定、能重復(fù)的僅有放射免疫分析(RIA)法,又稱Farr法。
抗ENA(可提取性核抗原)抗體
抗原從小牛胸腺或兔胸腺中撮,采用瓊脂擴(kuò)散法或?qū)α髅庖唠娪緳z測(cè),近年亦有用免疫印跡法檢測(cè)的,抗ENA抗體中主要包括抗Sm和nRNP等七種抗體,mRNP或U1RNP抗原為七種分子量不同的蛋白質(zhì)(12-68KD)與U1RNA(U為尿嘧啶核苷酸)結(jié)合的復(fù)合物;而Sm為同樣七種蛋白質(zhì)與U2、U1、U4、U5、U6RNA所形成的復(fù)合物;抗Sm抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的陽(yáng)性率為20%——25%,為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的標(biāo)記性抗體,常和抗ds-DNA抗體伴隨出現(xiàn),與疾病活動(dòng)性無(wú)關(guān),可作為回溯性診斷的參考指標(biāo);抗U1RNP抗體可在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn),其高效價(jià)除發(fā)生在系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)?,常是診斷混合結(jié)締組織病的重要血清學(xué)依據(jù)。ENA抗體中與系統(tǒng)性紅斑狼瘡關(guān)系密切的有以下4種:
A.抗Sm抗體:Sm抗原中的主要蛋白組分有SmB/B'(28kD、29kD)和SmD(13.5kD),其中抗SmD抗體最有特異性,而SmB/B'在抗原序列上與RNP(核糖核蛋白)相近似,抗RNP抗體在混合性結(jié)締組織?。∕CTD)中陽(yáng)性率最高。免疫印跡(IBT)法檢測(cè)抗Sm抗體時(shí)13.5kD總是與28kD、29kD伴隨,而28kD、29kD抗體可單獨(dú)出現(xiàn)。只有13.5kD與28kD、29kD同時(shí)出現(xiàn)時(shí)才能確定“抗Sm抗體陽(yáng)性”??筍m抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的“標(biāo)記抗體”,僅在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中能檢測(cè)到,有很高的特異性,但僅有不到1/3的患者出現(xiàn)此抗體。較早的研究認(rèn)為單獨(dú)出現(xiàn)Sm抗體腎臟與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害要比dsDNA抗體輕。20世紀(jì)90年代后期對(duì)Sm抗體的研究觀察到抗Sm(抗SmB/B')、抗ds-DNA抗體與抗心磷脂抗抗體(ACL)有一定的相關(guān)性,即在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中ACL抗體陽(yáng)性者伴有抗Sm和抗dsDNA抗體的比率要顯著高于抗ACL陰性者。抗Sm抗體與光敏感有關(guān),抗Sm陽(yáng)性的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者皮膚最小紅斑量要明顯低于抗Sm陰性者。還有研究發(fā)現(xiàn)抗SmD(抗SmD183-119)抗體與疾病活動(dòng)相關(guān),急性發(fā)病、伴有關(guān)節(jié)炎、蝶形紅斑、嗜睡、漿膜炎和腎炎者其抗Sm抗體滴度特別高,抗體滴度隨癥狀好轉(zhuǎn)而下降。
B.抗核糖核蛋白(RNP)抗體:RNP抗原的主要蛋白組分為U1-70kD、U1-A(32kD)及U1-C(17.5kD)。IBT法檢測(cè)時(shí)29kD、28kD可伴隨以上條帶同時(shí)出現(xiàn);如果IBT法檢測(cè)單獨(dú)出現(xiàn)29kD、28kD時(shí)不能簡(jiǎn)單確定為“抗Sm抗體”或“抗RNP抗體”,應(yīng)根據(jù)CIE的電泳結(jié)果。因此,對(duì)各種ENA抗體的檢測(cè)不應(yīng)僅用一種方法,而應(yīng)采用IBT與CIE兩種方法??筊NP抗體出現(xiàn)在30%以上的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中。該抗體出現(xiàn)一般預(yù)示預(yù)后較好,腎損害輕。
C.抗Ro(SS-A)和抗La(SS-B)抗體:通常采用對(duì)流免疫電泳法檢測(cè),近亦可用免疫印跡法測(cè)定。用前法檢測(cè)抗Ro/SS-A抗體陽(yáng)性率為30%——39%,抗La/SS-B為13%;兩種抗體對(duì)原發(fā)性干燥綜合征和系統(tǒng)性紅斑狼瘡合并干燥綜合征以及亞急性皮膚型紅斑狼瘡呈高陽(yáng)性率和重要參考價(jià)值??筊o/SS-A抗體是新生兒紅斑狼瘡的重要血清學(xué)標(biāo)記 ,與光敏感相關(guān)。抗Ro/La抗體更多出現(xiàn)于亞急性皮膚型紅斑狼瘡(亞急性皮膚型紅斑狼瘡)、干燥綜合征(SS)和新生兒紅斑狼瘡(NLE)以及先天性房室傳導(dǎo)阻滯中。Ro蛋白抗原有60kD和52kD 2種,60kD的抗體在亞急性皮膚型紅斑狼瘡中多見(jiàn),52kD的抗體多出現(xiàn)于SS中。La蛋白抗原主要是48kD。此兩種抗體(或1種)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中出現(xiàn)時(shí)多伴有SS。在臨床上觀察到凡是抗Ro或La抗體陽(yáng)性的系統(tǒng)性紅斑狼瘡其預(yù)后較好;也有報(bào)道ANA與抗Ro抗體同時(shí)出現(xiàn)易合并血管炎和腎炎,而ANA與抗La抗體、抗RNP抗體同時(shí)出現(xiàn)時(shí)則臨床癥狀輕微。
皮膚狼瘡帶試驗(yàn)(LBT)
應(yīng)用直接免疫熒光抗體技術(shù)檢測(cè)皮膚免疫熒光帶或狼瘡帶,即用直接免疫熒光(DIF)在真皮表皮連接處見(jiàn)到Ig和補(bǔ)體的帶狀沉積,主要為IgG,其次為IgM、IgA。LBT皮損處陽(yáng)性率在急性皮膚型紅斑狼瘡、亞急性皮膚型紅斑狼瘡和盤狀紅斑狼瘡均為90%左右,但正常皮膚系統(tǒng)性紅斑狼瘡的陽(yáng)性率為50%——70%,而盤狀紅斑狼瘡為陰性。如盤狀紅斑狼瘡的正常皮膚LBT為陽(yáng)性,則提示可轉(zhuǎn)化為系統(tǒng)性紅斑狼瘡。一般于前臂伸側(cè)或屈側(cè)正常皮膚處取材,前者陽(yáng)性率高,后者陽(yáng)性率低,但因伸側(cè)與陽(yáng)光接觸,有時(shí)會(huì)有假陽(yáng)性。如于臀部等皮膚非暴露部位取材其陽(yáng)性率最低,但對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡最有診斷價(jià)值。對(duì)那些臨床和實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn)都不特異的病例,非皮損處LBT陽(yáng)性是一個(gè)非常有用的診斷信息。
曾凡飲等采用1M.Nacl分離人皮膚DIF法對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者進(jìn)行狼瘡帶的研究,發(fā)現(xiàn)本法的陽(yáng)性率達(dá)90.9%,以Ig沉積于真皮側(cè)最為常見(jiàn),其次為沉積于真表皮兩側(cè),而未見(jiàn)單純于表皮側(cè)的病例,熒光形態(tài)以線狀多見(jiàn),少數(shù)為顆粒太。近來(lái)張學(xué)軍等采用熱分離表皮真皮法在5例大皰性系統(tǒng)性紅斑狼瘡中有3例血管結(jié)合在真皮側(cè),另2例與真皮側(cè),表示出抗體異質(zhì)性。
與判斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡病情有關(guān)的實(shí)驗(yàn)檢查
以下實(shí)驗(yàn)檢查僅有助于判斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡是否活動(dòng),了解臟器損害程度,無(wú)助于診斷。
血沉:增快,在活動(dòng)時(shí)可>100mm/h,是判斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動(dòng)與否的重要指標(biāo)。如在系統(tǒng)性紅斑狼瘡治療過(guò)程中出現(xiàn)血沉又復(fù)增快時(shí)需與感染區(qū)別。
血清蛋白:白蛋白降低,在有嚴(yán)重腎損害時(shí)可很低;γ和α2球蛋白升高,纖維蛋白原、冷球蛋白和冷凝集素均可增高;IgG、IgM、IgA及IgE在活動(dòng)期時(shí)可有不同程度的升高,尤其是IgG最為顯著。
血清補(bǔ)體:總補(bǔ)體和C1、C3、C4、C2及C9在活動(dòng)時(shí)降低,有時(shí)下降程度與病情相一致,尤其是在有腎損害時(shí)。但有些先天性補(bǔ)體缺陷的患者易患系統(tǒng)性紅斑狼瘡,其特點(diǎn)是皮膚損害重而腎損害輕。
循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC):CIC在活動(dòng)時(shí)升高。由于影響CIC檢測(cè)結(jié)果的因素較多,而目前大都采用聚乙二醇(PEG)沉淀法,其結(jié)果不穩(wěn)定,所以對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡病情判斷的意義不大。
類風(fēng)濕因子(RF):約1/3以上的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者可陽(yáng)性,但滴度不高。RF滴度的高低是系統(tǒng)性紅斑狼瘡與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎在實(shí)驗(yàn)診斷上的重要區(qū)別之一。
細(xì)胞免疫功能測(cè)定:淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(PHA-LTT)、舊結(jié)核菌素(OT)、鏈球菌脫氧核糖核酸酶和鏈激酶(SD-SK)皮試往往陰性。
T細(xì)胞亞群檢測(cè):采用單克隆抗體熒光技術(shù)示活動(dòng)性病例中總T細(xì)胞(CD3)和抑制性T淋巴細(xì)胞(CD8)明顯降低,輔助性T細(xì)胞(CD4)/抑制性T細(xì)胞(CD4)(CD8)比值增高,隨著治療病情穩(wěn)定,T抑制細(xì)胞恢復(fù)正常,T輔助細(xì)胞降低,兩者比值恢復(fù)或低于正常。
自然殺傷細(xì)胞(NK):采用酶(LDH)釋放法檢測(cè)NK活性結(jié)果示活性顯著降低,在活動(dòng)期更為顯著。
皮膚試驗(yàn):采用自身或同種的白細(xì)胞進(jìn)行皮試,75%系統(tǒng)性紅斑狼瘡病例陽(yáng)性。采用小牛胸中核蛋白作皮試,84%(21/25)陽(yáng)性。采用小牛胸腺中脫氧核糖核酸作皮試,48%(12/25)陽(yáng)性。采用小牛胸腺中組蛋白作皮試,92%(23/25)陽(yáng)性。
毛細(xì)血管鏡檢查:于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者手指甲皺和舌尖微循環(huán)中可見(jiàn)多樣形成的障礙,表現(xiàn)為:①微血管袢增多,微血管張力較差,微血管擴(kuò)張尤以靜脈管擴(kuò)張較突出,甚至有巨血管出現(xiàn);②微血流障礙,如血色暗紅,微血管袢頂瘀血,袢內(nèi)血細(xì)胞聚集、流速減慢或瘀滯;③微血管周圍有滲出和出血。
這些微循環(huán)障礙導(dǎo)致血流瘀滯和血細(xì)胞聚集異形微血管、巨形微血管和擴(kuò)張膨大微血管,皆可形成微血管周圍的滲出和出血,同時(shí)又可進(jìn)一步發(fā)展形成血流的泥化,甚至有微血栓產(chǎn)生,造成惡性循環(huán)。
血液流變學(xué)測(cè)定:呈顯著異常,如全血比粘度、全血還原粘度,血漿粘度增加,這些提示血粘度的增加,血液流動(dòng)性的下降;紅細(xì)胞電泳時(shí)間延長(zhǎng),血沉快,K值增大,一致表明紅細(xì)胞聚集性的增加,但血細(xì)胞壓積普通稍低(貧血);血中纖維蛋白原增高,血液粘聚性增加,導(dǎo)致血流緩慢,為活血化瘀中醫(yī)治療提供理論基礎(chǔ)。
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