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血液標(biāo)本的采集和處理：

血液標(biāo)本的采集是分析前質(zhì)量控制的重在環(huán)節(jié)，可分為毛細(xì)血管采血法和靜脈采血法。需要血量較少的檢驗(yàn)，如手工法或半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀血細(xì)胞計(jì)數(shù)，常用毛細(xì)管采血法。需血量較多檢驗(yàn)，如紅細(xì)胞比積、臨床生化檢驗(yàn)、全自動(dòng)血細(xì)胞分析血細(xì)胞計(jì)數(shù)一般用靜脈采血法。特別是全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，無論儀器進(jìn)樣品多少，為防止血樣中小凝塊的形成，保證儀器進(jìn)樣時(shí)標(biāo)本能充分混勻，原則上均應(yīng)使用靜脈血。毛細(xì)血管血和靜脈血之間，無論細(xì)胞成分或化學(xué)組成，都存在程度不同的差異。在判斷和比較所得結(jié)果時(shí)必須予以考慮。

某些生理因素，如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)和情緒激支等，均可影響血液成分。甚至一日之間，白細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值、淋巴細(xì)胞各亞群的比例等參數(shù)均有一定的波動(dòng)。服用某些藥物可能明顯干擾實(shí)驗(yàn)，得出假象結(jié)果。因此采血時(shí)，應(yīng)詢問濁否服用過明顯干擾試驗(yàn)的藥物（如阿司匹林對(duì)血小板聚集的抑制作用）關(guān)盡可能在一定時(shí)間在避免干擾因素條件下進(jìn)行，以便于比較和動(dòng)態(tài)分析。

一、毛細(xì)血管采血法

成人常用手指或耳垂采血。耳垂采血痛較輕，操作方便，適用于肥復(fù)采集，特別是手指皮膚粗厚者，但耳垂外周血循環(huán)較差，血細(xì)胞容易停滯，受氣溫影響較大，檢查結(jié)果不夠恒定。紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白和紅細(xì)胞比積結(jié)果均比靜脈血高，特別是冬季小波動(dòng)幅度更大。手指采血操作方便?？色@較多血量。嬰幼兒手指太小可用拇指或足跟采血。嚴(yán)重燒傷患者，可選擇皮膚完整處采血，采血器以用帶帶三棱針或?qū)Ｓ玫?ldquo;采血針”為好，特別是后者有利于采血技術(shù)的質(zhì)量控制，為了避免交叉應(yīng)嚴(yán)格實(shí)行一人一針制。應(yīng)注意穿刺的深度的適當(dāng)，切忌用力擠壓，以免混入組織液，影響檢驗(yàn)結(jié)果。

二、靜脈采血法

幾位于體表的淺靜脈均可作為采血部位，通常采用肘部靜脈，肘部靜脈不明顯時(shí)，可用手背靜脈或內(nèi)踝靜脈。幼兒可于頸外靜脈采血。根據(jù)采血量可選用不同型號(hào)注射器配血相應(yīng)的針頭。某些特殊的檢查，比臺(tái)血小板的激活，要使用塑料注射器和硅化處理后的試管或塑料閉幕式管。采血前應(yīng)向病人作適當(dāng)解釋，以消除不必要的疑慮和恐懼。如遇個(gè)別病人采血后發(fā)生暈厥，可讓其平臥，通常休息片刻即可恢復(fù)。必要時(shí)可嗅芳香氨酊，針刺或指掐人中，合谷等穴位。止血帶壓迫時(shí)間不難過長(zhǎng)，歸好不超過半分鐘，以避免瘀血和血液濃縮，有試驗(yàn)證明，壓迫時(shí)間過長(zhǎng)，可引起纖溶活性增強(qiáng)，血小板釋放及甘些因子活性增強(qiáng)，影響某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果。注射器和容器必須干燥，抽血時(shí)避免產(chǎn)生大量泡沫，向血后應(yīng)先拔針頭，然后將血液徐徐注入標(biāo)本容器。否則可能導(dǎo)致溶血。溶血標(biāo)本不僅紅細(xì)胞半數(shù)，紅細(xì)胞比積降低，血漿清化學(xué)組成也會(huì)產(chǎn)生變化，影響鉀、鎂、轉(zhuǎn)氨酶等多項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定。有些試驗(yàn)需用具有嚴(yán)密寒緊的，潔凈的橡膠或塑料寒子的玻璃或塑料管作采血及儲(chǔ)存器。目前國(guó)外已經(jīng)普及（國(guó)內(nèi)已開始生產(chǎn)）的封閉式真空采血器，既有利于標(biāo)本的收集運(yùn)送和保存，又便于防止血液交叉感染，已開始在國(guó)內(nèi)推廣使用。

血液標(biāo)本的保存條件非常重要，不適當(dāng)保存直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，既便將血漿放在4.C冰箱內(nèi)保存，24小時(shí)后的因子活性也僅為采血后即刻實(shí)驗(yàn)結(jié)果的5%（減少95%），而供血液分析儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的血液只能在室溫下保存，低溫保存可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果減低。因此，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)止確定最佳的保存條件。

三、抗凝劑

抗凝劑種類很多，性質(zhì)各異，必須根據(jù)檢驗(yàn)止的適當(dāng)選擇，才能獲得預(yù)期的結(jié)果。現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)常用抗凝劑及其使用方法簡(jiǎn)述如下：

1、乙二胺四乙酸（EDTA）鹽EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結(jié)全成螯合物，從而阻止血液凝固。

Na2C10H14O8N2+CA2+→CAC10H12O8N2+2NA++2H+

EDTA鹽經(jīng)1000C烘干，抗凝作用不變，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。EDTA鹽對(duì)紅、白細(xì)胞形態(tài)影響很小，根據(jù)國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)公委員會(huì)（Internationalcommitteestandardofhematology，ICSH）1993年文件建議，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑，用量為EDTA-K2.2H2O1.5-2.2Mg（4.45±0.85μmol）/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K2對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)影響均較小，但二鈉溶解度明顯低于二鉀，有時(shí)影響抗凝效果，其他抗凝劑不適合于血細(xì)胞計(jì)數(shù)。表1-1是幾種抗凝劑對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響，EDTA影響小板聚集，不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗(yàn)。

2.枸椽酸鈉枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

2Na3C6H5O7+2CA2+→2CAC6H5O7-+6Na+

枸椽酸鈉有2Na3C6H5O7.和2Na3C6H5.11H2O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l（32g/l）水溶液（也有用106mmol/l濃度），與血液按1：9或1：4比例使用。枸椽鈉對(duì)凝血V因子有較好的保護(hù)作用，使其活性減低緩，故常用于凝血象的檢查，也用于紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定。因毒性小，是輸積壓保養(yǎng)中的成分之一。

由于枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內(nèi)達(dá)到抗凝目的的，而抗凝劑主要是作用于積壓漿成分，通常所謂的1：9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細(xì)胞比積正常血液內(nèi)的血漿成分而言。所以臺(tái)果對(duì)貧血或紅細(xì)胞增多癥患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝劑時(shí)，就會(huì)發(fā)生抗凝劑足或相對(duì)過多，這將明顯地影響凝象檢查結(jié)果。為了避免這種現(xiàn)象，有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)根據(jù)抗凝劑用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人紅細(xì)胞比積%）這一公式，來計(jì)算抗凝劑的用量。

3．草酸鈉（sodiumoxalate）草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。

草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過去主要用于凝務(wù)象檢查。實(shí)踐發(fā)現(xiàn)草酸鹽對(duì)凝備V因子保護(hù)功能差，影響凝血酶原時(shí)間測(cè)定效果；另外由于草酸鹽與鈣結(jié)合形成的是沉淀物，影響自動(dòng)凝血儀的使用，因此，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。

4．肝素（heparin）肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和暑堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖，是分散物質(zhì)，平均分子量為15000（2000-40000）。肝素可加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成，對(duì)抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu.盡管肝素可以保持紅細(xì)胞的自然形態(tài)，但由于其?？梢鸢准?xì)胞聚集關(guān)使用涂片在羅氏（）染色時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景，因此肝素抗凝血不適全血液學(xué)一般檢查。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑。