丹皮酚的測(cè)定—高效液相色譜法

　　應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定桂枝茯苓丸中丹皮酚的含量。

　　本方法適用于中成藥桂枝茯苓丸。

　　方法原理： 供試品于容量瓶中，加甲醇超聲提取，放冷，搖勻，得供試品溶液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)274nm處檢測(cè)丹皮酚的吸收值，計(jì)算出其含量。

　　試劑： 甲醇（色譜純）

　　儀器設(shè)備： 1儀器

　　1.1高效液相色譜儀

　　1.2色譜柱

　　YGW-C18（4.6mm×250mm，10μm）

　　1.3紫外吸收檢測(cè)器

　　2色譜條件

　　2.1流動(dòng)相：甲醇 水 = 60 40

　　2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：274nm

　　2.3柱溫：35℃

　　2.4流速：0.8mL/min

　　試樣制備： 1.稱取供試品

　　取桂枝茯苓丸（研細(xì)）0.3g，精密稱定。

　　2.對(duì)照品溶液的制備

　　精密稱取一定量的丹皮酚對(duì)照品，用重蒸水分別制成25.04、50.08、75.12、100.16、150.24、250.4μg/mL對(duì)照品溶液。

　　3.供試品溶液的制備

　　將供試品置50mL容量瓶中，加適量甲醇超聲處理1小時(shí)，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

　　注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

　　操作步驟： 1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

　　將上述系列標(biāo)準(zhǔn)濃度的對(duì)照品溶液，各進(jìn)樣10μL，以峰面積積分值對(duì)濃度進(jìn)行回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　2.供試品溶液的測(cè)定

　　分別精密吸取上述對(duì)照品溶液50.08μg/mL與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)274nm處測(cè)定丹皮酚的峰面積積分值，用外標(biāo)法計(jì)算出丹皮酚的含量。