方法名稱： 三磷酸腺苷二鈉注射液—總核苷酸的測定—分光光度法。

　　應(yīng)用范圍： 本方法采用分光光度法測定三磷酸腺苷二鈉注射液中總核苷酸的含量。

　　本方法適用于三磷酸腺苷二鈉注射液。

　　方法原理： 供試品加0.1mol/L磷酸緩沖液制成供試液，置紫外可見分光光度計，于259nm波長處測定吸收度，計算出其含量。

　　試劑： 磷酸緩沖液（0.1mol/L）。

　　儀器設(shè)備： 紫外可見分光光度計。

　　試樣制備： 1.磷酸緩沖液（0.1mol/L）。

　　取取磷酸氫二鈉35.8g，加水至1000mL，無水磷酸二氫鉀13.6g，加水至1000mL，二液互調(diào)pH值至7.0.

　　2. 供試品溶液的制備

　　精密稱取供試品適量，加0.1mol/L磷酸緩沖液使溶解并制成每1mL中含20&micro；g的溶液，即得供試品溶液。

　　注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

　　操作步驟： 取供試品溶液照紫外分光光度法，于波長259nm處測定吸收度，按C10H14N5Na2O13P3的吸收系數(shù)（E1%1cm）為279計算，即得。

　　注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計算含量。

　　參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.25.