方法名稱: 輔酶Q10片—輔酶Q10的測定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定輔酶Q10片中輔酶Q10(C59H90O4)的含量。
本方法適用于輔酶Q10片。
方法原理: 避光操作。供試品制成無水乙醇溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長275nm處檢測輔酶Q10吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 無水乙醇
儀器設(shè)備:
1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按輔酶Q10峰計算不低于3000。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相:甲醇:無水乙醇=50:50。
2.2 檢測波長:275nm
2.3 柱溫:室溫
試樣制備: 1. 稱取供試品
取本品20片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于輔酶Q1020mg)。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取輔酶Q10對照品適量,同供試品配制,搖勻,即得。
3. 供試品溶液的制備
將供試品加無水乙醇約40mL在50℃水浴中振搖溶解,放冷后,移置100mL量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,離心5分鐘,3000轉(zhuǎn)每分,取上清液即得。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長275nm處測定輔酶Q10的吸收值,計算出其含量。
參考文獻(xiàn): 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.654。