急性毒性：LD50：400～600 mg/kg(小鼠經口)；450～500 mg/kg(大鼠經口)。LD50： 1700～1900 mg/kg(小鼠經皮)；人經口估計致死劑量：10～20 g。

亞急性和慢性毒性：慢性中毒，多見于精制本品的包裝工，由于呼吸道吸入和皮膚污染所致，主要表現為乏力、頭昏、食欲減退、多汗、肌束顫動、“板頸”(頸部活動不自如)等癥狀，血ChE活性與癥狀間無一定相關。有報道血ChE活性抑制到50%左右，患者仍無明顯癥狀；ChE活性抑制更低時，仍有能力從事一般的活動。脫離接觸后ChE活性可逐步上升，但癥狀體征恢復較慢。

代謝：動物實驗證明，本品的代謝途徑中主要有兩方面的反應：甲氧基部分的水解，甲基由于烴基化（或甲基化）而被結合或轉移至肝的蛋白質；磷酸酯鍵的水解產生三氯乙醇，與葡萄糖醛酸結合后從尿排出。

中毒機理：本品為直接的ChE抑制劑，不需經肝臟氧化就發(fā)揮毒作用，但抑制的ChE，有部分能自然復能，故中毒發(fā)作快，恢復也快。本品在酸性介質中水解，先脫去甲基，成為無毒的去甲基敵百蟲，在堿性溶液中則發(fā)生脫氯化氫反應，變?yōu)槎拘暂^大的敵敵畏。

刺激性：家兔經眼：120 mg/6 d(間歇)，輕度刺激。

致癌性：大鼠經口最低中毒劑量(TDL?0)186 mg/kg，6周(間歇)，疑致腫瘤，肝腫瘤。

致突變性：微生物致突變性：鼠傷寒沙門氏菌3400 nmol/皿。哺乳動物體細胞突變性：小鼠淋巴細胞80 mg/L。姊妹染色單體交換：倉鼠肺20 mg/L。