方法名稱： 克拉霉素片－克拉霉素－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定克拉霉素片中克拉霉素的含量。

本方法適用于克拉霉素片。

方法原理： 供試品加流動相溶解并稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長210nm處檢測克拉霉素的峰面積，計算出其含量。

試劑： 1. 乙腈

2. 磷酸鹽緩沖液

3. 磷酸

4. 三乙胺

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按克拉霉素峰計算不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：磷酸鹽緩沖液 乙腈=600 400

2.2 檢測波長：210nm

2.3 柱溫：45℃

2.4 流速：1.0mL/min

試樣制備： 1. 磷酸鹽緩沖液

稱取磷酸二氫鉀9.11g，加水溶解并稀釋至1000mL，加三乙胺2mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取克拉霉素對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.35mg的溶液，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于克拉霉素35mg），置100mL量瓶中，加流動相充分振搖使溶解并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長210nm處測定克拉霉素（C38H69NO13）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.232。