方法名稱：

三七片－人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測定－高效液相色譜法

應用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定三七片中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。

本方法適用于中成藥三七片。

方法原理：

本品加甲醇加熱回流，放冷，補重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長203nm處檢測人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的吸收值，計算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 乙腈

儀器設備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按三七皂苷R1峰計算應不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈為流動相A，水為流動相B

時間（分鐘）

流動相A（%）

流動相B（%）

0~12

19

81

12~60

19→36

81→64

2.2檢測波長：203nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取本品10片，精密稱定，研細，取約0.8g，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品和三七皂苷R1對照品適量，加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rg10.4mg、人參皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品10片，精密稱定，研細，取約0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，放置過夜，置80℃水浴上加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長203nm處測定人參皂苷Rb3（C53H90O22）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p323。