方法名稱：

復(fù)方黃連素片－鹽酸小檗堿的測定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

該方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。

該方法適用于中成藥復(fù)方黃連素片。

方法原理：

供試品細(xì)粉溶于沸水中，加鹽酸處理，上清液用流動相稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測鹽酸小檗堿的峰面積，計算出其含量。

試劑：

1.乙腈

2.稀鹽酸 取鹽酸234mL，加水稀釋至1000mL

3. 磷酸二氫鉀溶液，0.033mol/L

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液 = 40 60

2.2 檢測波長：265nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1.稱取供試品

取該品20片，除去糖衣，精密稱定，求出平均片重，研細(xì)，精密稱取總重量的1/20，為供試品。

2.對照品溶液的制備

精密稱取在100°C干燥的鹽酸小檗堿對照品約25mg，置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2ml，用流動相稀釋至刻度，搖勻（每1mL含鹽酸小檗堿0.008mg）。

3，供試品溶液的制備

供試品置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，離心（每分鐘轉(zhuǎn)速位4000轉(zhuǎn)），精密量取上清液2ml，置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長265nm處測定鹽酸小檗堿（C20H17NO4 · HCl）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p534。