方法名稱： 異福酰胺片－利福平、異煙肼與吡嗪酰胺－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定異福酰胺片中利福平、異煙肼與吡嗪酰胺的含量。

本方法適用于異福酰胺片。

方法原理： 供試品加流動相溶解并稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測利福平、異煙肼與吡嗪酰胺的峰面積，計算出其含量。

試劑： 1. 庚烷磺酸鈉溶液（0.01mol/L）

2. 乙腈

3. 稀磷酸

儀器設備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

氰基鍵合硅膠為填充劑

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液（稀磷酸調(diào)節(jié)pH值至.2） 乙腈=44 56

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取利福平對照品、異煙肼對照品和吡嗪酰胺對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋制成與供試液濃度相同的溶液，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片，除去薄膜衣，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量（約相當于利福平60mg），置100mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定利福平（C43H58N4O12）、異煙肼（C6H7N3O）、吡嗪酰胺（C5H5N3O）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，二部，p.221。