茶葉中多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫藍色絡合物。用分光光度法測定其含量。
實驗室常規(guī)儀器及下列各項:分析天平: 感量0.0001g。分光光度儀。
所用試劑應為分析純(AR),水為蒸餾水。
1 酒石酸亞鐵溶液:稱取1g (準確至0.0001g) 硫酸亞鐵和5g (準確至0.0001g)酒石酸鉀鈉,用水溶解并定容至1L(溶液應避光,低溫保存,有效期一個月)。
2 pH7.5磷酸鹽緩沖液:磷酸氫鈉: 稱取23.377g磷酸氫二鈉,加水溶解后定容至1L。磷酸二氫鉀:稱取9.078g磷酸二氫鉀,加水溶解后定容至1L。取上述磷酸氫二鉀溶液85ml和磷酸二氫鉀溶液15ml混合均勻。
1 取樣按《茶 取樣》的規(guī)定取樣。
2 試樣的制備按《茶 磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測定》的規(guī)定,制備試樣。
3 測定步驟 (1)試液的制備按《茶 水浸出物測定》中的規(guī)定,制備試液。 (2)測定準確吸取上述(1)試液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亞鐵溶液5mL,充分混合,再加pH7.5的緩沖液至刻度,用10mm比色杯,在波長540nm處,以試劑空白溶液作參比,測定吸光度(A)。 5、結(jié)果計算 計算方法和公式茶葉中茶多酚的含量,以干態(tài)質(zhì)量百分率表示,按下式計算: 茶多酚(%)=(A×1.957×2)/100 × L1/(L2×M×m)式中: L1——試液的總量,mL; L2——測定時的用液量,mL; M——試樣的質(zhì)量,g; m——試樣干物質(zhì)含量百分率,%; A——試樣的吸光度; 1.957——用10mm比色杯,當吸光度等于0.50時,每毫升茶湯中含茶多酚相當于1.957mg。 如果符合重復性的要求,則取兩次測定的算術(shù)平均值作為結(jié)果。 重復性同一樣品的兩次測定值之差,每100g試樣不得超過0.5g。