方法名稱：

腺苷鈷胺片—腺苷鈷胺的測定—分光光度法

應用范圍：

本方法采用分光光度法測定腺苷鈷胺片中腺苷鈷胺（C72H100CoN18O17P）的含量。

本方法適用于腺苷鈷胺片中腺苷鈷胺的測定。

方法原理：

取本品適量，除去包衣，研細，用水溶解并稀釋，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液為供試品溶液，并用水配制對照品溶液，分別取對照品和供試品溶液適量，各精密加0.65%氰化鉀溶液，密塞，搖勻，在兩側距離200mm處，用100W白熾燈各一個同時照射1小時，照紫外-可見分光光度法，在368nm波長處，分別測定吸收度，計算，并將計算結果與1.165相乘。

試劑：

1. 蒸餾水

2. 氰化鉀

儀器設備：

1. 可見分光光度計

2. 白熾燈

試樣制備：

1. 對照品溶液的制備

取維生素B12對照品約20mg，精密稱定，置500mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細，用水分次轉移至50mL量瓶中，振搖，使腺苷鈷胺溶解并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

注：“水分測定”用烘干法。取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100-105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含有水分的百分數。

操作步驟：

供試品的測定

精密量取上述對照品和供試品溶液各10mL，分別置25mL具塞試管中，各精密加0.65%氰化鉀溶液15mL，密塞，搖勻，在兩側距離200mm處，用100W白熾燈各一個同時照射1小時，照紫外-可見分光光度法，在368nm波長處，分別測定吸收度，計算，并將計算結果與1.165相乘。