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抗凝物質(zhì)測(cè)定

2009-06-25 15:59 來(lái)源:
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  抗凝物質(zhì)測(cè)定主要有如下四種:抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ:A)測(cè)定、血漿蛋白C(PC)測(cè)定、血漿蛋白S測(cè)定和血漿活化蛋白C抵抗(APCR)試驗(yàn)。

  1.抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ:A)測(cè)定

 ?。?)血漿抗凝血酶Ⅲ活性測(cè)定

  1)原理:發(fā)色底物法:受檢血漿中加入過(guò)量凝血酶,使AT-Ⅲ與凝血酶形成1:1復(fù)合物,剩余的凝血酶作用于發(fā)色底物S-2238,釋出顯色基因?qū)ο趸桨罚≒NA),顯色的深淺與剩余凝血酶呈正相關(guān),而與AT-Ⅲ呈負(fù)相關(guān)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT:A的含量。

  2)參考范圍:108.5%士5.3%。

 ?。?)血漿抗凝血酶Ⅲ抗原(AT:Ag)檢測(cè)

  1)原理:免疫學(xué)方法如火箭電泳法、免疫酶標(biāo)及免疫比濁法。

  2)參考范圍:0.29±0.06g/L。

  3)臨床意義:①增高見于血友病、白血病和再生障礙性貧血等的急性出血期以及口服抗凝藥物治療過(guò)程中。②減低見于先天性和獲得性AT-Ⅲ缺乏癥,后者見于血栓前狀態(tài)、血栓性疾病和肝臟疾病、腎病綜合征等。

  4)評(píng)價(jià):①標(biāo)本不能用肝素抗凝。②AT-Ⅲ抗原和活性測(cè)定最好同時(shí)檢測(cè),以利于進(jìn)行先天性AT-Ⅲ缺乏的分型。③在疑難DIC診斷時(shí),AT-Ⅲ水平下降具有診斷價(jià)值;急性白血病時(shí)AT-Ⅲ水平降低更可看作是DIC發(fā)生的信號(hào);抗凝治療中,如懷疑肝素抵抗,可測(cè)定AT-Ⅲ來(lái)確定;抗凝血酶代替治療時(shí),也應(yīng)首選AT-Ⅲ檢測(cè)來(lái)監(jiān)測(cè)。

  2.血漿蛋白C(PC)測(cè)定

  (1)血漿蛋白C活性測(cè)定

  1)原理:血漿蛋白C活性(PC:A)測(cè)定,發(fā)色底物法:受檢血漿中加入蛋白C激活劑(從蛇毒中提?。?。PC被激活為活化蛋白C(APC),APC作用于發(fā)色底物Chromozym PCA,釋出顯色基團(tuán)對(duì)硝基苯胺(PNA),顯色的深淺與受檢血漿中PC的含量成平行關(guān)系。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出AT:A的含醫(yī)學(xué).教育.網(wǎng).收集整理量。

  2)參考值:100.24%±l3.18%。

 ?。?)血漿蛋白C抗原測(cè)定

  1)原理:血漿蛋白C抗原(PC:Ag)檢測(cè),免疫火箭電泳法。

  2)參考值:102.5%±20.1%。

  3)臨床意義:減低:①見于先天性PC缺陷:根據(jù)PC:A和PC:Ag可分為Ⅰ型(PC:Ag與PC:A均減低)和Ⅱ型(PC:Ag正常而PC:A減低);②獲得性PC缺陷:DIC、肝功能不全、手術(shù)后、口服雙香豆素抗凝劑、呼吸窘迫綜合征等。

  3.血漿蛋白S測(cè)定

 ?。?)血漿總蛋白S測(cè)定

  1)原理:血漿總蛋白S(TPS)包括游離PS(FPS)和與補(bǔ)體C4結(jié)合的PS(C4bp-PS)。由于二者對(duì)于抗人蛋白S抗體有相似反應(yīng),因此用免疫學(xué)方法(如火箭電泳、酶聯(lián)免疫法)檢測(cè)的是TPS。

  2)參考值:97.56%±9.76% 。

  3)臨床意義:減低:見于先天性和獲得性PS缺陷癥,后者見于肝臟疾病、口服抗凝藥物等。

 ?。?)血漿游離蛋白S(FPS)測(cè)定:

  1)原理:凝固法。受檢血漿中加入乏PS基質(zhì)血漿(提供除PS外的其他凝血因子),PS可促進(jìn)APC對(duì)因子V a的抑制作用,纖維蛋白形成所需的時(shí)間與受檢血漿中FPS的量成正相關(guān)。受檢者凝固時(shí)間可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FPS的含量。

  2)參考值:100.9%士29.1%。

  3)臨床意義:參見血漿總蛋白S測(cè)定。

  4.血漿活化蛋白C抵抗(APCR)試驗(yàn)

 ?。?)原理:在受檢血漿中加入FⅫ激活劑和部分凝血活酶,啟動(dòng)內(nèi)源醫(yī)學(xué).教育.網(wǎng).收集整理性凝血途徑,再加入活化的蛋白C(APC),由于APC可裂解FⅧa、FⅤa,使其滅活,導(dǎo)致APTT延長(zhǎng)。如果受檢血漿APTT延長(zhǎng)不明顯,提示患者存在活化蛋白C抵抗現(xiàn)象。通過(guò)比較加和未加APC的APTT比值的高低判斷APCR存在與否。

  (2)參考范圍:APCR比值=APC-APTT(S)/APTT(S),>2.0。

  (3)臨床意義:FⅤ Leiden突變時(shí),APCR陽(yáng)性。

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