摘 要：本研究擬改造間接免疫熒光技術(shù)（IIF）抗核抗體（ANA）檢測法的底物HEp-2細(xì)胞，建立抗60kDRo60/SSA抗體免疫熒光檢測法。采用PCR擴(kuò)增人源Ro60 cDNA，克隆入真核表達(dá)載體pEGFP-C1，并轉(zhuǎn)染HEp-2細(xì)胞。通過熒光顯微鏡、免疫印跡法（IBT）及IIF鑒定轉(zhuǎn)染細(xì)胞（HEp-Ro60）中Ro60-綠色熒光蛋白（GFP）融合蛋白的表達(dá)和抗原性。分別以HEp-Ro60以及HEp-2為底物的IIF檢測10份抗Ro/SSA對(duì)流免疫電泳（CIE）檢測陽性、其他抗體陰性血清以及對(duì)照血清。獲得的轉(zhuǎn)染細(xì)胞傳十幾代后仍具有較強(qiáng)的Ro60-GFP表達(dá)，融合蛋白保持Ro60的抗原性。IIF檢測中HEp-Ro60的滴度比HEp-2增加了6.7倍（P＜0.01），而且2例HEp-2細(xì)胞上IIF檢測為陰性的血清在HEp-Ro60上為陽性。10例陽性血清中有8例出現(xiàn)了特征性熒光模式。

　　結(jié)論 是HEp-Ro60可用于IIF檢測抗Ro抗體，并增加了ANA檢出的敏感性。