所謂冰凍蝕刻，是把樣品放在-196℃的液態(tài)氮中迅速冷凍，然后加溫到-100℃，使樣品變得非常脆弱易碎，再用預先也冷卻到-196℃的非常鋒利的玻璃斷口切割經(jīng)冷凍的樣品，這樣使樣品在最容易斷裂的部位斷開（如果是微生物細胞，則多半是沿內(nèi)膜中部），然后讓樣品放在真空條件下升華掉斷口處的冰，最后用重金屬噴鍍該斷口表面，即可用電子顯微鏡觀察其結(jié)構(gòu)醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整,理。用這種制備方法的優(yōu)點是可以避免在固定、脫水和包埋過程中造成細胞結(jié)構(gòu)的人為改變而形成的假象醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理。

　　和投射電子顯微鏡是靠透過物體的電子成像不同，掃描電子顯微鏡的成像是靠觀察物體表面發(fā)射的電子。掃描電子顯微鏡是用聚焦得很細的電子束在樣品表面掃描。電子激發(fā)樣品表面的原子放電，釋放出微細的電子簇（二次電子），用靈敏的檢測裝置可以捕獲它們，然后通過類似電視機的原理將樣品圖象呈現(xiàn)出來。二次電子對檢測器的作用取決于樣品表面的性質(zhì)，當電子激發(fā)樣品表面突起部位時，會有大量二次電子進入檢測器，而表面凹陷處則只有少量二次電子進入，所以可以顯出反差突出、明暗清晰的三維圖象。而且它的成像焦深較長，圖象的立體感強，和肉眼所見差別不大。制備掃描電子顯微鏡的樣品也先要經(jīng)過固定、脫水等處理，以免在真空條件下變形失真，為了獲得較多的二次電子，表面要噴涂重金屬和碳原子。