周圍神經(jīng)缺損采用自體神經(jīng)移植均優(yōu)于其他移植體，在臨床上應用最為廣泛，按移植神經(jīng)的血供情況可分為傳統(tǒng)的神經(jīng)移植（CNG，即不吻合血管的神經(jīng)移植）和吻合血管的神經(jīng)移植（VNG）。對于瘢痕組織床上的長段神經(jīng)移植，動物實驗及臨床效果VNG明顯優(yōu)于CNG，而在正常組織床上行神經(jīng)移植時，帶血管的游離神經(jīng)移植與傳統(tǒng)的神經(jīng)移植相比有無明顯優(yōu)勢尚有爭議。McCullough，Shibata等的結(jié)果均表明：在正?；A(chǔ)上二種方法無明顯差別。但是，Restrep，Koshima等的結(jié)果卻表明：即使正常基床VNG仍優(yōu)于CNG.按移植段吻合時放置的位置，可分為順行放置吻合與逆行放置吻合，臨床上均有應用，但二種方法對術(shù)后神經(jīng)恢復效果是否有差異未見報道，也未見實驗研究報道。故本實驗研究設(shè)計：①順行放置吻合與逆行放置吻合的比較；②帶血管的游離神經(jīng)移植與不帶血管的游離神經(jīng)移植的比較，為臨床工作提供實驗依據(jù)，提高對神經(jīng)缺損的修復效果。

　　1　材料與方法

　　1.1　材料

　　1.1.1　實驗動物　選用4～5個月齡新西蘭兔78只，體重2～2.5kg，隨機分組，以6只作為正常對照組，其余72只等分為A、B、C、D四組，每組18只，每只白兔雙下肢均做同一種處理隨后組間進行對比。A組：帶血管蒂的順行放置吻合；B組：帶血管蒂的逆行放置吻合；C組：不帶血管蒂的順行放置吻合；D組：不帶血管蒂的逆行放置吻合。

　　1.1.2　實驗設(shè)備　①雙人雙目顯微鏡：XTS-6A，鎮(zhèn)江光學儀器廠生產(chǎn)。②顯微手術(shù)器械：寧波醫(yī)療器械廠生產(chǎn)。③常規(guī)手術(shù)器械。④日本OLYM-PUS光學顯微鏡。⑤日本NikonMicropphot-fax顯微照相機。⑥高精度電子天平。⑦石蠟切片機：德國REICHERT-JUNG1165型回轉(zhuǎn)式切片機。⑧DISA-1500型肌電圖儀（Dantes，Denark）。⑨加拿大Matrox-Ip8偽彩色圖像分析系統(tǒng)。⑩日立H-300透射電鏡。

　　1.2　手術(shù)方法　采用25%烏拉坦（4ml/kg）靜脈麻醉，手術(shù)區(qū)剪毛后常規(guī)消毒鋪單，做大腿后部正中切口，于股二頭肌和半腱肌、半膜肌的肌間隙分離顯露坐骨神經(jīng)。A組：避開供養(yǎng)坐骨神經(jīng)的血管，在梨狀肌出口下緣1cm處切斷坐骨神經(jīng)，在雙人雙目顯微鏡下用9-0無創(chuàng)縫合線原位施行神經(jīng)外膜縫合，接著在其遠側(cè)距近側(cè)吻合口1cm處再切斷坐骨神經(jīng)，亦縫合神經(jīng)外膜。B組：根據(jù)該段坐骨神經(jīng)滋養(yǎng)血管的情況，游離出一段包含滋養(yǎng)血管在內(nèi)的組織蒂，切除1cm坐骨神經(jīng)作為移植段，將移植段神經(jīng)逆行放置，縫合神經(jīng)外膜。C組：將移植段坐骨神經(jīng)與周圍組織完全游離順行放置，縫合神經(jīng)外膜。D組：將移植段坐骨神經(jīng)與周圍組織完全游離，逆行放置，縫合神經(jīng)外膜。逐層縫合深筋膜及皮膚，無菌紗布包扎，石膏外固定。放回籠中喂養(yǎng)，定期取材。

　　1.3　觀察指標

　　1.3.1　顯微解剖觀察　于術(shù)后4，醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理8，12周在手術(shù)顯微鏡下觀察移植神經(jīng)外觀，吻合口粘連程度，有無神經(jīng)瘤及瘢痕形成，神經(jīng)遠端有無變性及鉗夾神經(jīng)干后肢體的反應情況。

　　1.3.2　脛前肌稱重　完整切除雙側(cè)脛前肌，高精度天平稱重。

　　1.3.3　組織學觀察　對神經(jīng)進行取材，在近端、遠端吻合口以遠3mm，分別切取坐骨神經(jīng)，做HE染色及鋨酸髓鞘染色，光鏡下觀察，并進行軸突圖像分析，每張切片拍4張不同視野、放大40倍的彩照，置于加拿大MATROX-Ip8偽彩色圖像分析系統(tǒng)下進行分析。計算神經(jīng)移植段及神經(jīng)遠端橫截面軸突的數(shù)目及再生軸突的恢復率，恢復率計算方法是以對照組正常神經(jīng)橫切面軸突數(shù)為基數(shù)，與各時間組再生神經(jīng)遠端橫斷面軸突數(shù)目比較，得出各自的再生軸突恢復率，并對各組結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。

　　1.3.4　電生理檢查　術(shù)后12周測定神經(jīng)傳導速度、誘發(fā)電位波幅、潛伏期，使用DISA-1500型肌電誘發(fā)儀（DANTES，DENMARK），進行雙側(cè)動作電位（CMAP）檢查，將刺激電極插到神經(jīng)移植段以上，同心針記錄電極插入脛前肌，刺激電極距離記錄電極60.0mm，將地電極插入二者之間的肌肉中，給予電刺激，頻率1Hz，時程0.1ms.當CMAP圖形穩(wěn)定，偽跡和動作電位起點清楚后，測量記錄潛伏期（LAT）、波幅（AMP）及神經(jīng)傳導速度（CV）。打印圖形及有關(guān)數(shù)據(jù)。