1.受試者的選擇：一般選擇健康男性；年齡一般在18～40歲，同批受試者年齡一般不宜相差10歲或以上；體重與標(biāo)準(zhǔn)體重相差±10％，同批受試者體重應(yīng)相近，體重單位以kg計；

　　身體健康，無心、肝、腎、消化道、神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及代謝異常等病史，并進行健康體檢（如檢查心電圖、血壓、心率、肝功能、肺功能和血象等），應(yīng)無異常；無藥物過敏史，無體位性低血壓史。兩周前至實驗期間不服用其他任何藥物，實驗期間禁煙、酒及含咖啡因的飲料。試驗單位應(yīng)與志愿受試者簽訂知情同意書。

　　2.參比制劑與受試制劑參比制劑：生物利用度和生物等效性研究，必須有參比制劑作對照。參比制劑的安全性和有效性應(yīng)該合格，參比制劑選擇的原則如下：進行絕對生物利用度研究時選用上市的靜脈注射劑為參比制劑。進行相對生物利用度或生物等效性研究時，應(yīng)選擇國內(nèi)外同類上市主導(dǎo)產(chǎn)品作為參比制劑。

　　受試制劑：受試制劑應(yīng)為符合臨床應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的放大試驗產(chǎn)品，提供體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價等數(shù)據(jù)。個別藥物尚需提供多晶型及光學(xué)異構(gòu)體資料。

　　3.試驗設(shè)計：對于兩個制劑，即一個為受試制劑，另一個為參比制劑。通常采用雙周期兩制劑交叉試驗設(shè)計，以抵消實驗周期和個體差異對實驗結(jié)果的影響。即將受試者隨機分成兩組，一組先服用受試制劑，后服用參比制劑；另一組先服用參比制劑，后服用受試制劑。兩個試驗周期之間為洗凈期，洗凈期通常為1周或2周。

　　對于3個制劑，即兩個受試制劑和一個參比制劑，此時宜采用3制劑、3周期的二重3×3拉丁方式試驗設(shè)計。同樣每個周期之間的洗凈期通常為1周或2周。

　　取樣點對實驗結(jié)果的可靠性起著十分重要的作用。服藥前取空白血樣。一個完整的血藥濃度-時間曲線應(yīng)包括吸收相、分布相和消除相。一般在血藥濃度-時間曲線峰前部至少取4個點，峰后部取6個或6個以上的點，峰時間附近應(yīng)有足夠的取樣點，總采樣點不少于11個點。取樣持續(xù)到3～5個半衰期或血藥濃度為Cmax的1／10～1／20.血樣（血漿、血清或全血）應(yīng)立即冷凍備測。

　　4.服藥劑量：進行生物利用度與生物等效性研究時，藥物劑量一般應(yīng)與臨床用藥劑量一致。受試制劑和參比制劑最好應(yīng)用等劑量。如需使用不相等劑量時，應(yīng)說明原因，計算生物利用度時應(yīng)以劑量校正。

　　5.研究過程：受試者禁食過夜（10小時以上），于次日早晨空腹服用受試制劑或參比制劑，用250ml溫開水送服。服藥后2小時后方可飲水，4小時后進統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)餐。受試者于服藥后，按要求在不同時間取靜脈血。根據(jù)需要取血樣（全血、血漿或血清），并冷凍貯存，備測。受試者服藥后避免劇烈活動。取血樣在臨床監(jiān)護室中進行。如受試者有不良反應(yīng)時應(yīng)有應(yīng)急措施，必要時應(yīng)停止試驗。

　　6.藥物動力學(xué)分析：將所得的各受試者不同時間樣品的血藥濃度數(shù)據(jù)及平均值與標(biāo)準(zhǔn)差列表并作圖，然后分別對各受試者進行有關(guān)藥物動力學(xué)參數(shù)求算，并求出參數(shù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。

　　主要的藥物動力學(xué)參數(shù)為消除半衰期（t1/2）、峰濃度（Cmax）、峰時間（tmax）和血藥濃度-時間曲線下面積AUC.Cmax、tmax用實測值表示，不得內(nèi)推。AUC0→t（零到t時間的血藥濃度-時間曲線下面積）用梯形法計算，tn是最后一次可測濃度的取樣時間。AUC0→∞（零到無限大時間的血藥濃度-時間曲線下面積）按下式計算，AUC0→∞＝AUC0→tn + Ctn/λZ.Ctn是最后一點的血藥濃度，λZ是末端消除速度常數(shù)。t1/2可按t1/2＝0.693／λZ求出。λZ可用對數(shù)血藥濃度-時間曲線線末端直線部分的斜率求得。

　　零時間至最終采血點的AUC0→tn要求（AUC0→tn／AUC0→∞）×100％＞80％。

　　7.生物利用度計算（1）單次給藥：生物利用度F應(yīng)用各個受試者的AUC0→tn和AUC0→∞分別計算，并求其均值與標(biāo)準(zhǔn)差。受試制劑（T）和參比制劑（R）劑量相同時：

　　代謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)：對于一些前體藥物，由于藥物在體內(nèi)代謝極快，無法測定血中原型藥物，此時可采用相應(yīng)的活性代謝物進行生物利用度研究。

　　結(jié)果判斷以AUC0→tn為主，參考AUC0→∞。

　?。?）多次給藥：在下列情況下，可考慮多次給藥達穩(wěn)態(tài)后，用穩(wěn)態(tài)血藥濃度估算生物利用度：

　?、偎幬镂粘潭认嗖畈淮螅账俣扔休^大差異；

　　②生物利用度個體差異大；

　　③緩釋、控釋制劑；

　?、墚?dāng)單次給藥后原藥或代謝產(chǎn)物濃度很低，不能用相應(yīng)的分析方法精密測得。