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對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)80℃干燥至恒重的秦皮甲素對(duì)照品20mg,置10ml量瓶中,加乙醇適量,振搖使溶解,必要時(shí)可微溫加熱,放冷,加乙醇至刻度,搖勻,即得。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對(duì)照品溶液30μl、50μl、70μl、90μl與110μl,照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn),沿硅膠G薄層板的起始線分別點(diǎn)成3~5cm的長(zhǎng)條(據(jù)點(diǎn)樣量的多少而定),以正丁醇-氯仿-甲苯-甲酸(8:1:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視定位,分別刮取對(duì)照品條斑置具塞錐形瓶中。同時(shí)刮取同一薄層板下端與條斑等面積的硅膠G作為空白,置另一具塞錐形瓶中,各瓶均精密加入乙醇10ml,45℃水浴小心加熱30分鐘,放冷,濾過(guò),取續(xù)濾液,照分光光度法,在336nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,以吸收度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測(cè)定法取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約1g,精密稱定,置50ml具塞錐形瓶中,精密加入乙醇10ml,稱定重量,加熱回流30分鐘,放冷,再稱定重量,用乙醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液作為供試品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn),精密吸取供試品溶液50μl,沿硅膠G薄層板的起始線點(diǎn)成5cm的長(zhǎng)條,另精密吸取對(duì)照品溶液5μl,點(diǎn)于供試品條斑一側(cè)間隔1.5cm處,作為對(duì)照。以正丁醇-氯仿-甲苯-甲酸(8:1:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視,刮取與對(duì)照品色譜中斑點(diǎn)相應(yīng)位置上的供試品色譜中的條斑,照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法,自“置具塞錐形瓶中”起,依法測(cè)定吸收度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中秦皮甲素的重量,計(jì)算,即得。
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