染色顯微鏡檢查的實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)有哪些？為了幫助大家了解，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為您提供匯總：

實(shí)驗(yàn)步驟

（1）取干凈的載玻片，用記號筆在其一面做好正反面標(biāo)記，再在載玻片另一面中央滴上一小滴蒸餾水。

（2）將接種環(huán)在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標(biāo)記的單個小菌落中取少許細(xì)菌置于蒸餾水中混勻（同時蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環(huán)涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細(xì)菌，待冷卻進(jìn)行染色。

（3）先滴加草酸結(jié)晶紫溶液染色1——2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液染色1——2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30——60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進(jìn)行復(fù)染30——60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。

（4）將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進(jìn)行鏡檢，觀察其形態(tài)特征，判斷細(xì)菌的種屬 。

注意事項(xiàng)

標(biāo)本涂片不能太厚，若涂片較厚，應(yīng)延長脫色時間，直至不在出現(xiàn)紫色為止。染色過程中勿使染色液干涸。用水沖洗后，應(yīng)吸去玻片上的殘水。革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是脫色時間。如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌；如脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響 。

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