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1、取材:無菌條件下取足月產(chǎn)胎兒臍帶(4~5cm);
2、然后提?。簾o菌條件下去除臍帶內(nèi)的血液、臍帶外膜組織及血管組織,提取臍帶wharton膠組織;
3、培養(yǎng):無菌條件下取1mm3臍帶wharton膠組織,利用組織塊貼壁法和雙酶消化法培養(yǎng);
4、傳代、擴(kuò)增:待細(xì)胞融合傳代后,將其沖洗、消化后按比例繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增;
5、分離、純化:利用貼壁培養(yǎng)篩選法、密度梯度離心法、流式細(xì)胞法分離、純化干細(xì)胞;
6、治療:干細(xì)胞培養(yǎng)成功后通過靜脈滴注、腰穿、動(dòng)脈介入等方法植入患者體內(nèi)。
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