檢驗(yàn)師：《答疑周刊》2020年第37期

2020-05-20 16:28 來源：醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)

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《微生物學(xué)及檢驗(yàn)》重要考點(diǎn)（二）

1.常用的堿性染料有堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫、亞甲藍(lán)等。

2.常用的酸性染料有伊紅、剛果紅等。

3.電離后顯色離子帶正電荷，易與帶負(fù)電荷的被染物結(jié)合。由于細(xì)菌的等電點(diǎn)在pH2～5之間，在堿性、中性、弱酸性的環(huán)境中細(xì)菌均帶負(fù)電荷，易與帶正電荷的染料結(jié)合而著色。

4.培養(yǎng)基種類：

（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：含有基礎(chǔ)生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分，最常用的是肉浸液，俗稱肉湯，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?；A(chǔ)培養(yǎng)基廣泛用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn)，也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

（2）營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長(zhǎng)因子等特殊成分，供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長(zhǎng)因子的細(xì)菌生長(zhǎng)。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。

（3）鑒別培養(yǎng)基：利用細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同，在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物，通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基等。

（4）選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入抑制劑，去抑制標(biāo)本中的雜菌生長(zhǎng)，有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長(zhǎng)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂，其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌，枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌，因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。

（5）特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基，除含營(yíng)養(yǎng)成分外，還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì)，如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對(duì)細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型，由于胞內(nèi)滲透壓較高，故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

5.細(xì)菌的接種與分離技術(shù)：

（1）常用的平板劃線分離法有以下兩種：①連續(xù)劃線分離法：此法主要用于雜菌不多的標(biāo)本。②分區(qū)劃線分離法：本法適用于雜菌量較多的標(biāo)本。

（2）斜面接種法：該法主要用于單個(gè)菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細(xì)菌的某些特性。

（3）液體接種法：多用于一些液體生化試驗(yàn)管的接種。

（4）穿刺接種法：此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。

（5）傾注平板法：測(cè)定牛乳、飲水和尿液等標(biāo)本細(xì)菌數(shù)時(shí)常用此方法。

（6）涂布接種法：常用于紙片法藥物敏感性測(cè)定，也可用于被檢標(biāo)本中的細(xì)菌計(jì)數(shù)。

6.血瓊脂平板上的溶血分類：

（1）α溶血：菌落周圍血培養(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀；紅細(xì)胞外形完整無(wú)缺。

（2）β溶血：紅細(xì)胞的溶解在菌落周圍形成一個(gè)完全清晰透明的環(huán)。

（3）γ溶血：菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化；紅細(xì)胞沒有溶解或無(wú)缺損。

（4）雙環(huán)：在菌落周圍完全溶解的暈圈外有一個(gè)部分溶血的第二圓圈。