脯氨酸測(cè)定

方法名稱(chēng)： 脯氨酸的測(cè)定—電位滴定法

應(yīng)用范圍： 本方法采用滴定法測(cè)定脯氨酸的含量。本方法適用于脯氨酸。

方法原理： 供試品加冰醋酸溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，記錄高氯酸滴定液的使用量，計(jì)算，即得。

試劑：

1. 水（新沸放置至室溫）

2. 高氯酸滴定液（0.1mol/L）

3. 冰醋酸

4. 基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀

5.結(jié)晶紫指示液

6. 醋酐

7. 醋酸汞試液

試樣制備：

① 高氯酸滴定液（0.1mol/L）

配制：取無(wú)水冰醋酸（按含水量計(jì)算，每1g水加醋酐5.22mL)750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐23mL，邊加邊搖，加完后再振搖均勻，放冷，加無(wú)水冰醋酸適量使成1000mL，搖勻，放置24小時(shí)。若所測(cè)供試品易乙?；瑒t須用水份測(cè)定法測(cè)定本頁(yè)的含水量，再用水和醋酐調(diào)節(jié)至本液的含水量為0.01%-0.2%。

標(biāo)定：取在105℃干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g，精密稱(chēng)定，加無(wú)水冰醋酸20mL使溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用本液緩緩滴定至藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即可。

貯藏：置棕色玻璃瓶中，密閉保存。

②結(jié)晶紫指示液

取結(jié)晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得。

操作步驟： 精密稱(chēng)取供試品0.1g，加冰醋酸50mL溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，記錄消耗高氯酸滴定液的體積數(shù)（mL），每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于11.51mg的脯氨酸（C5H9NO2），即得。

注1：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一,“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.657。

性狀檢驗(yàn)

酸度測(cè)定： 取本品2.0g，加水20ml溶解后，依法測(cè)定，pH值應(yīng)為5.9～6.9。

溶液透光度測(cè)定： 取本品1.0g，加水10ml溶解后，照分光光度法，在430nm的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，不得低于98.0%。

氯化物檢驗(yàn)：取本品0.25g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更濃(0.02%)。

硫酸鹽檢驗(yàn)：取本品1.0g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更濃(0.02%)。銨鹽 取本品0.1g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液2.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更深(0.02%)。

其他氨基酸檢驗(yàn)：取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液,作為供試品溶液；精密量取適量，加水稀釋成每1ml中含0.25mg的溶液，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－無(wú)水乙醇－濃氨溶液－水(8:8:1:3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干,噴以茚三酮的丙酮溶液(1→50)，在80℃干燥約10分鐘,立即檢視，供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深(0.5%)。干燥失重 取本品，在105℃干燥3小時(shí)，減失重量不得過(guò)0.3%。

熾灼殘?jiān)翰坏眠^(guò)0.1%。

鐵鹽檢驗(yàn)：取本品1.0g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更深(0.001%)。重金屬 取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十。

砷鹽檢驗(yàn)：取本品2.0g，加鹽酸5ml與水23ml溶解后，依法檢查(附錄Ⅷ J第一法），應(yīng)符合規(guī)定(0.0001%)。

熱原檢驗(yàn)：取本品,加氯化鈉注射液制成每1ml中含45mg的溶液,依法檢查(附錄Ⅺ D），劑量按家兔體重每1kg注射10ml，應(yīng)符合規(guī)定（供注射用）。

本品為吡咯烷-2-羧酸。按干燥品計(jì)算，含C5H9NO2不得少于98.5%。