條件控制：

　?、偎惺軝z者取樣前1周內(nèi)未服用任何抗生素、鉍劑、抗酸劑及H2受體拮抗劑，1個(gè)月內(nèi)未服用類固醇類藥物或非類固醇類抗炎藥如阿司匹林等；②所有受檢者均無嚴(yán)重全身性系統(tǒng)疾病，非Ⅱ度或Ⅱ度以上牙周炎患者、非口腔粘膜扁平苔蘚患者；③各組間年齡、性別、取樣位置和方法、患者牙周條件等可控制因素通過均衡檢驗(yàn)，證實(shí)無差異，具有可比性。

　　Hp-PCR檢測方法：

　　所有受檢者檢測晨均按指導(dǎo)刷牙，取樣前用無菌生理鹽水輕輕將口腔漱干凈，然后刮取每位受檢者頰、舌、口底、軟腭粘膜少許（ROU患者以潰瘍假膜代替相應(yīng)部位的口腔粘膜），同時(shí)通過胃鏡取胃體部粘膜（PU患者取潰瘍部位）作為標(biāo)本，置于無菌生理鹽水的尖嘴離心管，-40℃保存?zhèn)錂z。將備檢標(biāo)本放入400μl無菌生理鹽水溶液中離心12000r/min×5min，棄上清，加DNA裂解液50μl，蛋白酶K2μl，55℃孵育1h，100℃水浴10min，同時(shí)設(shè)置陽性模板和陰性對照（PacificEcon-TechCo.USAPCR試劑盒）；15000r/min×5min離心后，取5μl進(jìn)行PCR檢測。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物取15μl，用15g/L瓊脂糖凝膠（含0.5g/L溴化乙錠）經(jīng)TAE電泳緩沖液，電泳30min（電壓5v/cm）后在紫外透射反射儀300nm下觀察結(jié)果，如果在200bp處出現(xiàn)橙黃色條帶，則診斷為Hp陽性（+）。

　　胃粘膜Hp培養(yǎng)：

　　C組口腔Hp陽性患者的胃粘膜做Hp培養(yǎng)，以使與口腔Hp比較。在幽門前5cm范圍內(nèi)用滅活活檢鉗鉗取組織2塊，置于裝有30%甘油/布氏肉湯轉(zhuǎn)送液0.5ml無菌離心管中-20℃保存。用改良Skirrow培養(yǎng)基，在含6%微氧條件下37℃培養(yǎng)2～4天后觀察醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)搜集整理。

　　口腔Hp抗Hp免疫熒光抗體染色：

　　①熒光抗體的制備：胃粘膜培養(yǎng)出來的Hp4株混合配制成每毫升10億個(gè)細(xì)菌的懸浮液，耳緣靜脈注射免疫家兔，8次后查血，凝集效價(jià)為1：2560，特異性實(shí)驗(yàn)與大腸桿菌、空腸彎曲菌凝集效價(jià)均不超過1：80.抗體血清用不飽和硫酸銨提成粗球。再用0.25mol/L硫酸鹽緩沖液將粗球抗體稀釋成1%濃度后裝入透析液中，用同一緩沖液將異硫氰酸熒光素配成0.1g/L，10倍于1%抗體體積，放入燒杯中，用電磁攪拌器在4℃冰箱內(nèi)透析24小時(shí)，經(jīng)sephadex-G50層析，去除游離熒光素。②染色方法：將口腔潰瘍假膜稀釋于0.1ml的生理鹽水中，攪勻后涂于蓋玻片上，經(jīng)固定后滴上熒光抗體，置于37℃暗室冰箱中30分鐘，再經(jīng)pH值7.2的硫酸鹽緩沖液沖洗3次，封片。熒光顯微鏡觀察，以胃粘膜培養(yǎng)出的Hp作陽性對照。